上海邦景实业有限公司

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转基因植物Sad1基因PCR检测试剂盒
转基因植物Sad1基因PCR检测试剂盒
参考价2990
具体成交价以合同协议为准
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    经销商
  • 所在地

    上海市

规格
50T2990元15 盒 可售

更新时间:2024-01-25 09:50:05浏览次数:55

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【简单介绍】
货号 BJ-P7945 规格 50T
保存 -20℃避光
转基因植物Sad1基因PCR检测试剂盒公司正在出售的产品:胆南探针法PCR鉴定试剂盒胰蛋白(PANCPIN)ELISA试剂盒淡豆豉探针法PCR鉴定试剂盒胰弹性蛋白(ELA1)ELISA试剂盒大枣探针法PCR鉴定试剂盒胰安肽(Aglycin)ELISA试剂盒大青叶探针法PCR鉴定试剂盒伊默菌(EMD)ELISA试剂盒

转基因植物Sad1基因PCR检测试剂盒
QQ截图20240112102747.png

产品名称

产品货号

包装规格

转基因植物Sad1基因PCR检测试剂盒

BJ-P7945

50T

运输:低温

保存:-20℃避光

有效期:一年

货期:2-3周

产品用途:公司产品仅供科研研究实验

试剂组成:

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特点:

1. 即开即用,用户只需要提供样品。

2. 根据保守序列设计的专一性引物。

3. 灵敏度可以达到几百拷贝/反应。

4. 一管式荧光定量PCR检测,避免后续污染。

5. 本试剂盒足够50次20μL反应体系的荧光定量PCR。

本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。

操作流程:

RNA 提取 → 反转录 → 设计引物 → Q-PCR

一、 总RNA提取

A组织样本:迅速将新鲜的组织切成合适的大小,在液氮中充分研磨后加裂解液裂解,或直接加入裂解液后用匀浆器匀浆。每30-50mg组织加1ml Trizol。

B全血样品:加入3-5倍体积的红细胞裂解液到血样中,室温孵育10min,室温3500rpm离心6min。弃上清,原每2-3ml全血样品加1mL Trizol。

C细胞样品:悬浮液中生长的细胞,通过离心收集细胞后,每1×105〜106细胞加入1mL Trizol,移液器吹打混匀,直接裂解或-80℃储存一个月。贴壁生长的细胞,有两种处理方法。一种是移除培养基后,将1mL Trizol直接加入直径3.5cm的培养皿中裂解细胞。或是先用将贴壁细胞消化下来并收集后,再加入1mL Trizol进行裂解。(Note:加入Trizol前, PBS充分洗涤细胞去除残余培养基。)

二、直接法

1)加入1ml Trizol试剂,混匀,冰上孵育10min。

2)4℃,12000rpm离心10min,小心转移上清液到不含颗粒的新EP管中。

3)加入200ul氯仿,剧烈振荡15秒,室温孵育5min。

4)4℃,12000rpm离心15min。混合液分三层,包括最下面的氯仿有机相,中间相和上层水相。小心转移上层水相到新的EP管(大约60%体积的Trizol),不要吸取中间相,可留下少量上层液体!(Note:质量比数量更重要!)

5)加入等体积的异丙醇,轻轻地颠倒混匀约10次,室温放置10min。

6)4℃,12000rpm离心10min。弃上清,1ml 75%乙醇洗涤RNA沉淀两次。

7)4℃,12000rpm离心5min,弃上清,室温下风干5-10min(不要太干,过度干燥会导致RNA难溶解!)。将RNA溶于15μl-50μlDEPC水中。

8)立即进行反转录反应,或先-80℃长期保存。

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注意事项:

1、所有步骤均应在超净工作台上进行,超净台紫外照射至少15min。

2、所有试剂应为此实验专用。

3、使用75%乙醇或其他去污剂擦拭工作台,避免表面污染。

4、进入荧光定量PCR 操作实验室后需要佩戴一次性无菌口罩、无菌乳胶手套、实验中尽量避免与同事交谈,防止PCR 模板污染。

5、实验中使用各种规格的离心管,枪头及配制试剂和溶解沉淀用的水,均应焦碳酸二乙酯(DEPC)处理后使用,以去除吸附的RNA酶污染。

6、使用Trizol试剂时,避免接触皮肤或衣服。避免吸入蒸气。

7、qPCR反应需要qPCR级水,试剂和试管。请务必使用正确类型的qPCR光学PCR管和盖子。不可用普通的PCR管。

8、加样前,先布局,规划加样顺序以避免交叉污染。

9、所有实验应均应设置无模板对照,其中包含除DNA或cDNA样品以外的所有反应组分。

10、先配制qPCR反应混合液,减少误差。

11、加样后上机前,务必通过瞬离将反应液离至管底,并消除溶液中的气泡,因为气泡会干扰荧光检测且降低酶活性,从而降低扩增效率。

 




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