狂犬G蛋白(GP)标记抗体狂犬病主要是通过被狂犬病毒感染的动物的撕咬、抓挠受伤而传播。在中国,狂犬病的主要传播来源是被RABV感染的狗和猫等。当前,对于狂犬病感染或发病后的治疗方法尚未实现,因而及时接种狂犬病疫苗可在很大程度上有效防制狂犬病。目前我国动物用狂犬病疫苗主要是传统灭活疫苗和弱毒疫苗,弱毒疫苗存在返毒的危险,而灭活疫苗则存在灭活不*的风险。基因工程亚单位疫苗由于不含有强毒的感染性组分,所以不必进行灭活措施,是新型疫苗研究的重要发展方向。G(glycoprotein)蛋白是狂犬病毒的五种组成蛋白之一,由524个氨基酸组成,蛋白分子质量约为62KD。G蛋白是狂犬病毒中糖基化的,以及可诱导机体产生中和抗体的结构蛋白。因此,G蛋白既是狂犬病毒中有效的保护性抗原,同时也是研究基因工程亚单位疫苗的抗原,是狂犬病基因工程亚单位疫苗研究的热点。本课题研究中,利用狂犬病病毒CTN-1V10株为模板,以生物工程合成的方法合成编码G蛋白的基因片段G。将该片段插入大肠杆菌pET-28a载体中,构建重组质粒,构建完成后,将重组质粒转化入大肠杆菌感受态细胞BL21(DE3)表达目的蛋白,SDS-PAGE电泳及Western blot结果表明,重组蛋白在大肠杆菌系统中实现了大量可溶性表达,在此基础上,进一步对该蛋白的反应原性和免疫原性进行了研究与分析。首先以狂犬病病毒CTN-1V10株(Genebank:AEV43285)为模板,设计相应的特异性引物,以生物工程合成的方法合成编码G蛋白的基因片段G,片段大小为1884bp。
狂犬G蛋白(GP)标记抗体
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