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CHO-K1细胞

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具体成交价以合同协议为准
  • 公司名称上海莼试生物技术有限公司
  • 品       牌其他品牌
  • 型       号T25
  • 所  在  地上海市
  • 厂商性质经销商
  • 更新时间2021/8/17 13:57:52
  • 访问次数657
产品标签:

CHO-K1细胞

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     上海莼试生物技术有限公司Shanghai C-reagent Biotechnology  Co. Ltd.  专业服务于生命科学领域,拥有分子生物学、医学、药学、化学等方面的科研技术团队,经营科研生化试剂、分析试剂、实验耗材,推出技术先进、质量稳定的科研产品。为全国乃至于世界各地科研机构、工业、电子、医疗、科技等领域的客户,提供系统的产品资源及配套技术服务。推出十几个种类产品线,部分产品接受定制服务!



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产品名称 中国仓鼠卵巢细胞;CHO-K1 英文名称 CHO-K1
规格 T25 货号 CS-X63210
CHO-K1细胞在倒置镜下观察被消化的细胞,如果细胞变园,相互之间不再连接成片,这时应立即在超净台中将消化液倒掉,加入3~5ml新鲜培养液,吹打,制成细胞悬液。
CHO-K1细胞 产品信息

以下是细胞的订购信息:

英文简称:CHO-K1细胞    

产品名称:中国仓鼠卵巢细胞;CHO-K1

规格:T25

形态特性:上皮样

生长特性:贴壁生长

特征特性:1957年,PuckTT从成年中国仓鼠卵巢的活检组织建立了CHO细胞,CHO-K1是CHO的一个亚克隆。CHO-K1的生长需要。

培养条件:DMEM+10%FBS

传代方法:1:2传代

货号:CS-X63210

细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

图片13.jpg

细胞培养的优点:
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。

注意事项:
(1)冻存前细胞状态,细胞在对数生,细胞密度适合,刚刚发生细胞融合,过密或连成片的细胞状态不好,而且消化时不容易分散;
(2)冻存的密度不宜过低,10的6次方-7次方的数量级比较好,我冻存的细胞一般T25培养瓶(5*107),一瓶冻一管(1.5ml冻存管),10cm培养皿(大概10的8次方个细胞)分成两管。
(3)消化和吹打,切忌消化过度,吹打不可太用力,不要吹出好多泡泡。消化后立即加入*培养基吹打哦,不是加入冻存液再吹打。
(4)离心后加入冻存液。冻存液中FBS的用量对于肿瘤细胞株而言要求不是很严格,我从10%-90%都用过,问题不大,个人认为10%-20%可以了,能节约处就节约点嘛!另外,冻存液可以在处理细胞前配置,放在4度冰箱预冷。细胞离心后直接用预冷的冻存液重悬,移入冻存管。
(5)关于“慢冻”,传统的方法,LLC细胞冻存管用棉花包好,4度2h,-20度2h或更长,-80度过夜,最后液氮。对于条件较好的实验室和细胞冻存数量多的实验室,使用程序降温盒,内装异丙醇,在-80度并内可以逐渐降温,很方便,省了包棉花、4度、-20度了。
噬相关基因AMBRA1抗体    AMBRA1抗体

脊髓小脑失调症蛋白1抗体    ATXN1/Ataxin-1抗体

乙酰羧化酶抗体    Acetyl CoA Carboxylase抗体

细胞核重定位及纺锤体检查点蛋白AMN1抗体    AMN1抗体

天连接糖基化11抗体    ALG11抗体

细胞衰老相关蛋白ASF1A抗体    ASF1A抗体

氨基糖苷类磷酸结构域蛋白抗体    AGPHD1抗体

唾液酸糖蛋白受体1抗体    ASGPR1抗体

芳香基硫酸酯酶F抗体    ARSF抗体

A激酶锚定蛋白5抗体    AKAP5抗体

小脑脊髓共济失调蛋白3抗体    ATXN3L抗体

ASTE1蛋白抗体    ASTE1抗体

微丝相关蛋白1抗体    AFAP抗体

芳基硫酸酯酶B抗体    ARSB抗体

γ氨基丁酸转氨酶抗体    ABAT抗体

共济失调蛋白2结合蛋白1抗体    A2BP1抗体

肿瘤坏死因子α转换酶    ADAM17抗体

芳香烃受体核转录蛋白2抗体    ARNT2 抗体

AlkB同源蛋白8抗体    ABH8抗体

ABI基因家族成员3结合蛋白抗体    ABI3BP抗体

Rho GTP酶激活蛋白20抗体    ARHGAP20抗体

含锚蛋白重复序列-细胞因子信号抑制物盒蛋白家族10抗体    ASB10抗体

乙醛脱氢酶1蛋白家族L1抗体    ALDH1L1抗体

轴抑制蛋白2抗体    Axin 2抗体

血管生成素相关蛋白6抗体    ANGPTL6抗体

Muellerian缪勒管激素抑制因子抗体    AMH抗体

蛋白激酶受体A8抗体    EphA8抗体

脂肪酰家族成员1抗体    Acetoacetyl-CoA synthetase抗体

蛤弧菌探针法荧光定量PCR试剂盒    Vibrio tapetis

创伤弧菌探针法荧光定量PCR试剂盒    Vibrio vulnificus

田鼠痘病毒探针法荧光定量PCR试剂盒    Volepox Virus

多瘤病毒探针法荧光定量PCR试剂盒    Washington University Polyomavirus(WUPyV)WU

韦塞尔斯布朗病毒探针法荧光定量PCR试剂盒    Wesselsbron Virus

白斑综合症病毒探针法荧光定量PCR试剂盒    White Spot Syndrome Virus(WSSV)

高首鲟虹彩病毒探针法荧光定量PCR试剂盒    White Sturgeon Iridovirus(WSIV)

RT-(RT-)牛羚关联恶性卡他热病毒探针法荧光定量PCR试剂盒    Wildebeest-associated Malignant Catarrhal Fever Virus (WA-MCF)

沃尔巴克氏菌通用探针法荧光定量PCR试剂盒    Wolbachia spp.

班氏丝虫探针法荧光定量PCR试剂盒    Wuchereria bancrofti

加州立克次体探针法荧光定量PCR试剂盒    Xenohaliotis californiensis

苛养木杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒    Xylella fastidiosa

木丝霉探针法荧光定量PCR试剂盒    Xylohypha bantania

亚巴猴肿瘤病毒病毒探针法荧光定量PCR试剂盒    Yaba Monkey Tumor Virus(YMTV)

酵母菌属通用探针法荧光定量PCR试剂盒    Yeast

CHO-K1细胞小肠结肠炎耶尔森菌探针法荧光定量PCR试剂盒    Yersinia enterocolitica

鼠疫耶尔森菌(鼠疫杆菌)探针法荧光定量PCR试剂盒    Yersinia pestis

假结核耶尔森菌探针法荧光定量PCR试剂盒    Yersinia pseudotuberculosis

鲁氏耶尔森菌探针法荧光定量PCR试剂盒    Yersinia ruckeri

耶尔森菌通用探针法荧光定量PCR试剂盒    Yersinia spp.

副溶血性弧菌//三重探针法荧光定量PCR试剂盒    toxR/tdh/trh

实验报告
一、产分离与培养:
   1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,最后将成1mm3左右大小;
   2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
   3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;
   4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
   5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
   1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
   2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
   4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗(Abbioscience公司),然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
   5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗(嘉美生物公司), 37℃条件下放置1h;
   6、用PBS冲洗3次,每次10min,最后在倒置荧光显微镜(Leica公司)下观察图像并拍照。

 

 

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