单体亲和素磁珠

公司产品仅供科研研究使用、不得用于临床诊断！

亲和素（或链霉亲和素）和生物su之间表现的相互作用，是已知的非共价相互作用高的一种。亲和素、链霉亲和素、 单体亲和素及其类似物已成为探针研究实验中强大的亲和配体工具，被广泛应用于生化分析、诊断、亲和纯化和药物递送。Monomer Avidin Magnetic Beads是一种高度均匀的超顺磁性微球，表面包裹着高密度的超纯（>97%）亚单位单体亲和素。单体亲和素源自天然四聚体蛋白，它保留了与天然亲和素相同的生物su结合特异性，但其生物su结合亲和力会有显著降低（kD=~10-8 M）。因此，通过使用温和的洗脱条件，例如含有2 mM 生物su的缓冲液，就可以很容易地从单体亲和素中洗脱结合的生物su化分子。本款磁珠经过专门设计、测试和质量控制，可用于免疫沉淀、细胞分选，以及从细胞裂 解液或杂交反应中快速一步捕获生物su化分子，如DNA、RNA、抗体或蛋白质。

产品特点：

·快捷，简单的一步法高通量操作;无需纯化柱或过滤器，或重复移液、离心等操作

（图1）

·结合能力，在温和的条件下洗脱结合的生物su化分子

·在温和的洗脱条件下纯化生物su化样品

·极小的非特异性结合

·对样本体积要求低，便于自动化操作

·成本低：只有市场同类产品磁珠价格的一半

·磁珠至少可以重复使用5次

缓冲液

·1x PBS Buffer (0.1 M 磷酸钠, 0.15 M 氯化钠; pH 7 ) ·1x Regeneration Buffer (0.1 M Glycine/HCl,pH 2.8) ·1x Blocking/Elution Buffer (2 mM D-生物su溶于 PBS)

磁力分离器（适用于手动操作）：根据实验时生物样品的体积，使用者可以选择以下不同型号的磁力分离器： 8 孔磁力架可以容纳 8 个单独的 1.5-2.0 ml 离心管 ; 24

孔磁力架可以容纳 24 个单独的 1.5-2.0 ml 离心管; 4 孔磁力-15 可以容纳 4 个单独的15ml 离心管; 4 孔磁力架-50 可以容纳四个单独的 50 ml 离心管。

操作过程

操作过程中实验体积可根据需要放大或者缩小

提示：在纯化生物su化蛋白质、多肽和其他分子之前。用户应将试剂盒中的所有试剂温度 平衡至室温，并用双蒸馏水配制 1x 工作溶液。

1. 轻轻震动装有磁珠的试剂瓶，直到磁珠悬浮。将 50µl 磁珠转移到新试管中。

提示：客户应根据每个实验粗样品中生物su化分子的数量，根据经验确定佳的磁珠

使用量。过多的磁珠会导致背景更高；磁珠使用量少会造成产量降低。我们建议纯化50μg 生物su化分子添加 50μl 悬浮的磁珠。

2. 将试管放在磁力分离器上1 分钟。当磁珠沉淀时，去除上清液。取下试管加入四倍 磁珠体积的d2H2O，充分混合。并将试管再次置于磁力分离器上1 分钟，去除上清 液。

3. 按照步骤2 所述方式，用四倍磁珠体积的1x PBS 缓冲液清洗磁珠。

4. 加入三倍磁珠体积的1xBlocking / Elution Buffer，通过涡旋充分混合，并在室温下培养5 分钟。将试管放在磁力分离器上1 分钟。去除上清液。

5. 加入六倍磁珠体积的1xRegenerationBuffer，通过涡漩充分混合，并将试管放在磁力分离 器上1 分钟。去除上清液。

6. 加入四倍磁珠体积的1x PBS Buffer，并按照步骤2 所述方式清洗磁珠。这些磁珠可以随时使用。

提示：必须立即使用磁珠，否则粘合能力将显著降低。

7. 向磁珠中加入含有生物su化分子的样品，通过移液器吹吸充分混合，并在室温下缓慢旋转培养30-60 分钟。

8. 将试管放在磁力分离器上，保持试管留在分离器上的同时去除上清液。如步骤 2 所示， 用1x PBS 清洗磁珠，直到在280 nm 处洗脱液的吸光度接近背景水平（OD280<0.05）。

9. 加入一倍磁珠体积的Blocking/Elution Buffer，通过移液器吹吸充分混合，并在室温下培养 5-10 分钟，将与磁珠结合的生物su化分子洗脱下来。

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