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上海哈灵生物科技有限公司
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ELISA试剂盒中牛乳中链霉素的作用
2013-11-28 阅读(708)
ELISA试剂盒初步组装和稳定的每盒点检查和优化，成功建立了一个稳定的6个月ELISA试剂盒，并以所组建的试剂盒对牛奶样品中的添加药物进行了测定。利用5C10杂交瘤细胞株的小鼠腹水单抗建立了检测SM残留的间接竞争ELISA方法。
氨基糖苷类抗生素是一类应用广泛的广谱抗菌药物
采用包被抗原稀释度1∶3200，腹水抗体的工作浓度1∶1.6×105，尺度曲线线性方程为y=1.0522-0.3276x（10～1000ng/ml），半数按捺浓度为93.22ng/ml，检测限约为5ng/ml。包括链霉素（SM），庆大霉素（GM），卡那霉素（KM）等，对奶牛，子宫内膜炎奶牛乳腺炎效果很好，通常用于兽医临床治疗及饲料药物添加剂。
患有乳腺炎的奶牛链霉素肌肉注射和乳腺癌药物治疗，用本试剂盒牛奶中链霉素残留浓度测定试剂盒，放弃了给药后至少2D和4.5天证明牛奶。分别采用CMO法、活化酯法、戊二醛法合成了链霉素的5种人工抗原，从免疫原性及不乱性等方面临5种抗原进行比较，*选择活化酯法合成的BSA-SM/b作为免疫抗原，通过杂交瘤技术获得1株能不乱分泌抗链霉素特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞株5C10。
通过实验比较了5种样品处理方法，选择用Careez法处理并4倍稀释后用于测定。
探索一种能够检测牛奶中链霉素残留量的快速和有效的方法，本研究采用单克隆抗体技术和酶联免疫吸附测定技术，合成人工抗原，制备出抗链霉素单克隆抗体，建立了检测牛奶中SM残留的ELISA测定法，组建成链霉素快速检测ELISA试剂盒并进行了优化和实际应用。
作为一种灵活，快速，特异的方法，酶联免疫吸附测定法已逐渐被应用于药物残留，在国内外建立了理化检测链霉素基地左乳，固然有些方法比较敏捷、，但因为方法复杂、耗时长、花费大、技术要求高等原因而不适合大批量样品的筛选。制备的腹水效价为1∶1280000，蛋白浓度为26.2mg/ml，与其他抗菌药物的交叉反应率均低于0.1%。
ELISA试剂盒尺度曲线的批内变异系数为11.87%，均匀批间变异系数为8.017%。建立ELISA尺度曲线的线性方程为y=1.8061-0.4932x（线性范围25～2500ng/ml），其LOD为8.11ng/ml，低于划定的牛奶中链霉素zui低残留*200ng/ml。然而，行政违法引起动物产品特别是哺乳期的牛奶中的兽药残留，对人体健康的潜在危害。
