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DMEM培养基是建立在平衡盐溶液的基础上
2013-12-23 阅读(1172)
绝大多数DMEM培养基是建立在平衡盐溶液基础上
zui广泛运用的培育基是Eearle`s MEM 的混合物,其间富含13种有必要氨基酸、8种维生素。而Ham`s F12 也包含非有必要氨基酸,维生素的规模亦很广,别的惯例富含无机盐和代谢添加剂。MEM/F12 这两种培育基各取1/2,构成神经生物学zui通用的培育基。
Dulbecco`s改进培育基——DMEM,现运用于疾速成长的细胞,同MEM富含一样的营养成分,但浓度高出2~4倍。挑选某种培育基,应细心晓得成分表,应晓得大多数景象下培育基都有缺少。例如,有些培育基在氨基酸中包富含谷氨酸,而这种培育基虽广泛用于神经生物学范畴,但它对某些对谷氨酸灵敏的可能有细胞外毒性损害的神经元而言,则并非*挑选,特别是若是神经元成长在缺少胶质的环境中时。
DMEM培养基中,谷氨酸比其他氨基酸有更高的浓度
这是由于它具有不稳定性以及在许多细胞培育中它常用作碳源。关于神经元的培育常常在根底培育基中添加葡萄糖的含量到0.6%或许参加丙酮酸(若培育基中这两种物质缺少时)。MEM与F12均要用5%的CO2来平衡,DMEM含更高浓度的NaCO3,要用10%的CO2来平衡,当然也能够在较低CO2浓度下运用。
这些DMEM培育基的组成成分是树立在对不一样细胞系成长的研讨之上的,但通常在原代培育中运用也能有对比令人满意的成果。原则上,HEPES作为缓冲剂可用来替代碳酸氢盐,以免除需求高浓度CO2培育环境的约束。实际操作中并非如此简略。