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抗血清鉴定参考意见
2013-12-25 阅读(924)
抗血清鉴定参考意见当免疫组化染色没有预期的结果时，应系统地找到原因，而每一次只能排除一个可能的原因。
① 确认是否忽视一些试剂添加，包括一抗、二抗、三抗及底物等。
② 确认所有的试剂是否按正确的顺序加入，是否有足够的时间。
③ 对照抗体的标签确认是否使用正确的抗体，以及所用的检测系统是否和一抗匹配，这一点是非常重要的。比如，如果反是抗体兔起源，二抗一定要用抗兔的二抗来匹配；或一抗是小鼠的IgM一抗，二抗必须是兔抗小鼠的IgM二抗。
④ 抗血清鉴定参考意见检查抗体所使用的稀释和稀释液。
⑤ 检查抗体的有效期和储存条件，尤其是标记了酶或荧光素的抗体，现在大多数试剂公司的抗体均要求在4~8℃条件下保存，应避免反复冻融，试剂保存时一定要避免与挥发性有机溶剂同放一室，以免降低抗体的效价。
⑥ 检查标本的储存条件，的已知阳性的标本来同时做阳性对照。
⑦ 检查色原/底物溶液，zui简单的检测方法是将一滴标记有酶的抗体加入到制备好的底物溶液中，如果底物发生预期的颜色变化，因素可排除基质。需要注意的是，有些底物在制成工作液后应在一段时间后用完，否则会失败。
⑧ 检查冲洗液是否反应试剂的比赛，溶液的pH值很重要，与过氧化物酶底物溶液，比赛中不应含有叠氮钠。
⑨ 抗血清鉴定参考意见检查复染剂和封片剂是否和色彩搭配使用。
