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上海哈灵生物科技有限公司
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明胶法人体胚胎干细胞繁殖试剂盒产品说明书
2017-4-1 阅读(698)
明胶法人体胚胎干细胞繁殖试剂盒产品说明书
主要用途
明胶法人体胚胎干细胞繁殖试剂是一种旨在通过特殊明胶替代滋养细胞作为培养表面的包被处理，提供细胞的附着生长，促进细胞繁殖，同时体外维护人体胚胎干细胞的多能性，抑制培养中的胚胎干细胞的自发分化的而经典的技术方法。该技术由大师级科学家精心研制、成功实验证明的。其适用于新的人体胚胎干细胞系的建立、培养已有的胚胎干细胞系以及无基质细胞的 CD34 干细胞等。产品即到即用，严格无菌、无病毒和支原体，性能稳定，促细胞生长效应，重复性高，建立标准化体系。
技术背景
胚胎干细胞生长在基质表面，稳定繁殖效应明显。同时，在富含各种营养元素的培养基中，包括精制胎牛血清，白血病抑制因子，非必需氨基酸、巯基乙醇以及预防污染的青霉素和链霉素等，维持胚胎干细胞活性。产品符合美国USDA、FDA和USP的规定。
产品内容
包被液（Reagent A） 毫升
营养液（Reagent B） 毫升
产品说明书 1份
保存方式
保存在4℃冰箱里，有效保证6月
用户自备
25cm2细胞培养瓶：用于干细胞培养的容器
微波炉：用于试剂加热融化的设备
细胞培养箱：用于细胞孵育培养的设备
实验提示
1． 准备1个25cm2细胞培养瓶
2． 取出包被液（Reagent A），拧松瓶盖（不要打开）
3． 放进微波炉加热（注意：避免溢出）
4． 移取 毫升包被液（Reagent A）到25cm2细胞培养瓶，均匀铺平
5． 室温下，静置30分钟
6． 使用无菌吸管，真空抽吸培养瓶里的包被液（Reagent A）
7． 加入1毫升（5X 105细胞）用户自备的人体胚胎干细胞
8． 加入 毫升营养液（Reagent B），混匀铺平 1
9． 放进37℃二氧化碳细胞培养箱孵育24小时
10．小心抽去细胞培养液
11．重复实验步骤8至10一次
12．传代前4小时使用2毫升营养液（Reagent B）换液一次，传代比例为1：1至1：10之间
注意事项
1． 本产品为10次操作
2． 严格无菌操作
3． 操作时须戴手套
4． 使用时，避免污染母液
5． 用户根据需求，可以添加各种生长因子，例如成纤维细胞生长因子（Fibroblast growth factor；FGF）等
6． 建议每天换液；如果溶液颜色为桔红色，务必即刻换液，不要等到溶液颜色为黄色
7． 建议按下表用量使用
8． 本公司提供系列细胞培养产品
质量标准
1． 产品经鉴定性能稳定
2． 本产品经鉴定无噬菌体、支原体、病毒污染
