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上海哈灵生物科技有限公司
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公司信息
可溶性包涵体蛋白复性（化学稀释II）试剂盒说明书
2017-9-29 阅读(924)
HL30044.4.2 v.A 可溶性包涵体蛋白复性（化学稀释II）试剂盒产品说明书
主要用途
可溶性包涵体蛋白复性（化学稀释II）试剂是一种旨在使用化学稳定方法，使可溶性变性纯化蛋白重新折叠，恢复其蛋白功能和活性的而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种可溶性纯化蛋白，尤其是细菌内重组蛋白（融合蛋白）以及盐酸胍或Sarkosyl可溶性处理的包涵体蛋白。可后续用于蛋白功能、酶活性等分析。产品即到即用，性能稳定，参数优化，操作便捷，复性效果理想。
技术背景
在蛋白纯化和融化过程中，特别是包涵体蛋白，变性剂（denaturant）提供了zui有效的手段，其获得的纯化蛋白属于变性蛋白（denatured protein）。为了使变性蛋白恢复为天然蛋白（native protein），即具有蛋白质的自然结构和活性，需要进行蛋白复性（renaturation）或重新折叠（refolding）。蛋白复性是一个复杂的过程，诸如pH、离子强度、低分子添加剂、氧化还原电位（redox potential）和温度等物化因子，影响体外蛋白复性的效率。通常体外复性的方法包括稀释法和缓冲交换法。前者通过化学处理，而后者采用物理方法（例如透析、膜过滤（diafiltration）、凝胶过滤层析（gel-filtration chromatography）等，以达到蛋白复性的效果。L-精氨酸（L－arginine）、聚乙二醇（PEG）、硫代甜菜碱（sulfobetaine）、去垢剂、变性剂等将影响化学稀释复性处理的效率。
产品内容
稳定液（Reagent A） 20毫升
产品说明书 1份
保存方式
保存在4℃冰箱里，有效保证6月
用户自备
1.5毫升离心管：用于样品保存的容器
恒温摇床：用于反应孵育
实验步骤
1．准备好可溶性纯化变性蛋白样品
2．移取50微升蛋白样品（10毫克/毫升）到1.5毫升离心管
3．加入950微升稳定液（Reagent A）
4．放进20℃恒温摇床孵育2小时，速度为200RPM
5．（选择步骤）移取10微升进行生物检测，例如蛋白功能或活性：比色法、HPLC、受体结合实验等确定复性蛋白活性值
6．即刻放进－70℃冰箱里保存
注意事项
1．本产品为20次操作
2．操作时须戴手套
3．本产品的复性效率达80％以上
4．建议与本公司系列包涵体蛋白溶解试剂盒配套使用
5．由于样品的特异性，用户可以优化温度、孵育时间、蛋白浓度，以获得zui大复性效率
6．如果复性效率过低，建议使用可溶性包涵体蛋白复性（物理透析）试剂盒－HL30044.5
7．如果获得满意的复性效果，用户可以按比例扩大复性容量
8．本公司提供系列包涵体蛋白处理试剂产品
质量标准
1．本产品经鉴定性能稳定
2．本产品经鉴定无蛋白酶污染
