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上海哈灵生物科技有限公司
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公司信息
冰冻切片神经组织金属锌蒂姆（TIMM）染色试剂盒产品说明书
2017-10-23 阅读(1796)
主要用途
冰冻切片神经组织金属锌蒂姆（TIMM）染色试剂是一种旨在使用蒂姆硫化法银染技术，分析存档中的冰冻组织切片里神经系统中含锌神经细胞结构的而经典的技术方法。该技术经过精心改良蒂姆（Timm）方法、成功实验证明的。主要适用于冰冻脑组织或外周神经组织切片，例如海马（hippocampus）中苔藓纤维区（mossy fiber region）和齿状分子层（dentate molecular layer）等含锌神经细胞体，例如锥体细胞（pyramidal cells）、齿状颗粒细胞（dentate granule cells）等检测。广泛用于脑神经病理生理，尤其是癫痫等疾病的研究。产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定，显色清晰。
技术背景
蒂姆硫化法银染（Timm’s sulfide silver staining）是由蒂姆建立的用于观察脑组织和其它组织中（例如胰腺、小肠、肾脏等）微量金属元素锌，以及其它重金属元素，例如铜、镍、钴和铁等的染色技术。主要用于观察中枢神经系统中含锌神经元，以及新轴突分枝（sprouted axon）和轴突终端（axon terminal）等结构，分析大脑灰质内部的海马中轴突终端（突触泡囊synaptic vesicle）、苔藓终端（齿状颗粒细胞dentate granule cells）中的反应性锌的分布，与突触活性和膜去极化的关系，研究神经退行性和癫痫病理性变化机制。其原理在于使用硫化物，与组织中的游离金属元素反应成为不溶性复合物沉积，进而在还原剂的作用下，金属硫化物催化还原离子银为可见金属银沉积，呈现黑色，即为金属自显影术（autometallography，AMG）。
用户自备
PBS缓冲液：用于灌注
无离子水：用于组织清洗
1.5毫升离心管：用于工作液配制的容器
无菌镊子：用于转移动物脑组织
小型玻璃染色缸：用于组织或切片处理的容器
切片机：用于组织切片
明胶化载玻片和盖玻片：用于切片后铺片
中性树脂：用于切片封片
光学显微镜：用于切片染色后观察分析
注意事项
1．本产品为10次操作，其中20次染色操作
2．操作时，须戴手套
3．铺片须使用明胶化载玻片，否则染色会掉片：*用毛笔涂刷；第二保持湿润3小时；第三用PARAFIN包裹后压片
4．切片建议10至50微米，过厚和过薄不利于检测神经细胞
5．注意操作安全，尤其使用固着液（Reagent B和C）
6．建议使用玻璃染色缸
7．每次更换试剂溶液时，保持切片面基本晾干
8．试剂溶液在切片表面时，避免有气泡存在，同时确保铺满切片表面
9．整个操作，在避光状态下进行
10．染色完成后，即刻进行光学显微镜观察
11．样品染色后保存，避免光照
12．本公司提供系列神经系统成分染色试剂产品
质量标准
1．本产品经鉴定性能稳定
2．本产品经鉴定显色清晰
