| 17-0020-01 | Sephadex G-10 medium（葡聚糖凝胶G-10） | Pharmacia | 25g |
| 葡聚糖凝胶G-10 Sephadex G-10 medium 葡聚糖凝胶使用说明 | |||
| 化学和物理性质 | |||
| 葡聚糖凝胶是一种珠状的凝胶，含有大量的羟基，很容易在水中和电解质溶 | |||
| 液中溶胀。G型的葡聚糖凝胶有各种不同的交联度，因此它们的溶胀度和分级分 | |||
| 离范围也有所不同。葡聚糖凝胶的溶胀度基本上不因盐和洗涤剂的存在而受影 | |||
| 响。 | |||
| 葡聚糖凝胶有不同的粒度。超细级的葡聚糖凝胶是用于需要*分辨率的柱 | |||
| 色谱和薄层色谱。粗级和中级的凝胶用于制备性色谱过程，可在较低的压力下获 | |||
| 得较高的流速。另外，粗级也可用于批量工艺。 | |||
| 化学稳定性 | |||
| 葡聚糖凝胶不溶于一切溶剂（除非它被化学降解）。它在水、盐溶液、有机 | |||
| 溶剂、碱和弱酸性溶液中都是稳定的，在强酸中凝胶骨架的糖苷键被水解。*接触氧化剂将破坏凝胶，因而应避免使用。 | |||
| 物理稳定性 | |||
| 葡聚糖凝胶并不熔融，可以在湿态、中性 PH 进行灭菌或在高压灭菌器 120 | |||
| ℃、 30 分钟而不影响它的色谱性质。干态的凝胶加热至120℃以上将开始焦糖化。 | |||
| 葡聚糖凝胶的机械强度取决于交联度。 | |||
| 产品说明： | |||
| 产 品 名 称 分 离 范 围 应 用 | |||
| 葡聚糖凝胶 G-10 <700 缓冲液交换、脱盐，分离小分子，去除小分子 | |||
| 葡聚糖凝胶 G-15 <1500 缓冲液交换、脱盐，分离小分子，去除小分子 | |||
| 葡聚糖凝胶 G-25 1000-5000 工业上脱盐及交换缓冲液 | |||
| 葡聚糖凝胶 G-50 1000-30000 多肽分离、脱盐、清洗生物提取液、分子量测定 | |||
| 葡聚糖凝胶 G-75 2000-70000 蛋白分离纯化、分子量测定、平衡常数测定 | |||
| 葡聚糖凝胶 G-100 2000-120000 蛋白分离纯化、分子量测定、平衡常数测定 | |||
| 葡聚糖凝胶 G-150 5000-300000 蛋白分离纯化、分子量测定、平衡常数测定 | |||
| 葡聚糖凝胶 G-200 5000-600000 蛋白分离纯化、分子量测定、平衡常数测定 | |||
| 使用方法： | |||
| 1. 乙醇浸泡： | |||
| 在室温下，将干粉浸泡于 50-60%乙醇中至少 24 小时，并不断搅拌以保证凝胶 | |||
| 溶胀，用无盐水洗去残存的乙醇滤干; | |||
| 2. 无盐水浸泡： | |||
| 室温下，在无盐水中充分溶胀 24 小时，间隙搅拌，以保证凝胶的*溶胀， | |||
| 然后； | |||
| 3. 盐酸浸泡： | |||
| 在常温下再用 0.2N HCl 浸泡 12 小时，间隙搅拌，滤干，水洗只中性； | |||
| 4. 将溶胀好的凝胶脱气后（真空抽滤或超声波）根据装柱要求一次性置入柱内， | |||
| 注意保持湿态装柱，并避免柱内产生气泡或断层； | |||
| 5. 上样前平衡层析柱至少 3-5 个柱体积直到记录仪基线变得平稳为止（流出液的 | |||
| PH值等于上柱的 Buffer 的 PH值）； | |||
| 6. 凝胶过滤的上样量一般为 5%的柱床体积，我们建议初次上样控制在 1-2%的 | |||
| 床体积，视分离情况可以调整；脱盐时上样量可以达到20%的柱床体积，柱高的选择也与分离要求相关，柱高控制在 40-50cm 以下，过高的凝胶层会引起较大 | |||
| 的反压，应当尽可能避免。难分离物质要有一定柱高和流速控制，脱盐时高径比 | |||
| 为 5：1 即可； | |||
| 7. 洗脱方法： | |||
| 可以用无盐水，也可以采用上柱时的缓冲液洗脱；在上柱 Buffer 中加入 NaCl | |||
| 等梯度洗脱或盐梯度洗脱也可以*分离纯化； | |||
| 8. 在位清洗（CIP） | |||
| 凝胶使用十次后作一次 CIP，目的是去除柱床内沉淀的及顽固残留的蛋白。 | |||
| 方法是以 40cm/h 用 1M 氢氧化钠反向洗四个柱体积，再以至少三个柱体积平衡 | |||
| 缓冲液再生。 | |||
| 备注: 其它规格葡聚糖凝胶处理方法类似。 | |||
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