实验原理：
　　
　　本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠白细胞介素2（IL-2）水平。用纯化的小鼠白细胞介素2（IL-2）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入白细胞介素2（IL-2），再与HRP标记的白细胞介素2（IL-2）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过*洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的白细胞介素2（IL-2）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中小鼠白细胞介素2（IL-2）浓度。
　　
　　小鼠白细胞介素-2（IL-2）说明书
　　
　　试剂盒组成48孔配置96孔配置保存
　　
　　说明书1份1份
　　
　　封板膜2片（48）2片（96）
　　
　　密封袋1个1个
　　
　　酶标包被板1×481×962-8℃保存
　　
　　标准品：3600pg/mL0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存
　　
　　标准品稀释液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存
　　
　　酶标试剂3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存
　　
　　样品稀释液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存
　　
　　显色剂A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存
　　
　　显色剂B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存
　　
　　终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存
　　
　　浓缩洗涤液（20ml×20倍）×1瓶（20ml×30倍）×1瓶2-8℃保存
　　
　　小鼠白细胞介素-2（IL-2）说明书
　　
　　样本处理及要求：
　　
　　1.血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。
　　
　　2.血浆：应根据标本的要求选择EDTA、者柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。
　　
　　3.尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。
　　
　　4.细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
　　
　　5.组织标本：切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。
　　
　　操作步骤
　　
　　标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔10孔，在*、第二孔中分别加标准品100μl，然后在*、第二孔中加标准品稀释液50μl，混匀；然后从*孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl，混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉，再各取50μl分别加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。（稀释后各孔加样量都为50μl，浓度分别为2400pg/mL，1600pg/mL，800pg/mL，400pg/mL，200pg/mL）。
　　
　　加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品zui终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
　　
　　温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
　　
　　配液：将30（48T的20倍）倍浓缩洗涤液用蒸馏水30（48T的20倍）倍稀释后备用。
　　
　　洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
　　
　　加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
　　
　　温育：操作同3。
　　
　　洗涤：操作同5。
　　
　　显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.
　　
　　终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
　　
　　测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。测定应在加终止液后15分钟以内进行。
　　
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