利用对人类干细胞系进行可诱导基因敲除

近日，来自美国威斯康星大学的华人科学家Su-Chun Zhang在学术期刊Cell Stem Cell发表了一项研究进展，他们利用CRISPR/CAS9技术实现了对人类干细胞系进行可诱导基因敲除，这一方法的成功对于研究基因在干细胞及分化不同阶段中的作用具有重要推动作用。

对基因表达进行的时间调控对于阐明一个基因在生物学系统中的功能至关重要，但到目前为止，在人类多能干细胞中实现可诱导基因敲除，建立可诱导基因敲除的人类干细胞系仍存在很大挑战。

在该项研究中，研究人员结合CRISPR/CAS9介导的基因组编辑和Flp/FRT以及Cre/LoxP系统成功实现建立了可诱导基因敲除的人类多能干细胞系。研究人员发现dual-sgRNA的靶向作用对于将FRT序列进行的双等位基因敲入非常重要。除此之外，他们还开发了出一种新的策略将一个可调控活性的重组酶表达体系同时导入细胞，移除了药物抗性基因，利用这种方法可以加快iKO hPSC细胞系的获得速度。

研究人员通过这种两步法敲除策略，对人类胚胎干细胞和诱导多能干细胞中的SOX2,PAX6,OTX2,AGO2等基因实现了可诱导性基因敲除，建立了相关细胞系。

研究人员相信，利用这种方法建立iKO hPSC细胞系将会改变人们以往对人类细胞中基因功能研究的方式，对于推动干细胞研究进展具有重要意义hzA047Hu    人肝细胞生长因子(HGF)ELISA试剂盒原理    ELISA Kit for Hepatocyte Growth Factor (HGF)
hzA548Hu    人细胞间粘附分子1(ICAM1)ELISA试剂盒原理    ELISA Kit for InterHZllular Adhesion Molecule 1 (ICAM1)
hzA049Hu    人干扰素γ(IFNγ)ELISA试剂盒原理    ELISA Kit for Interferon Gamma (IFNg)
hzA592Hu    人生长抑素(SST)ELISA试剂盒原理    ELISA Kit for Somatostatin (SST)
hzA575Hu    人胃动素(MTL)ELISA试剂盒原理    ELISA Kit for Motilin (MTL)
hzA876Hu    人降钙素基因相关肽(CGRP)ELISA试剂盒原理    ELISA Kit for Calcitonin Gene Related Peptide (CGRP)
hzA875Hu    人碳酸酐酶Ⅰ(CA1)ELISA试剂盒原理    ELISA Kit for Carbonic Anhydrase I (CA1)
hzA469Hu    人内皮脂肪酶(LIPG)ELISA试剂盒原理    ELISA Kit for Lipase, Endothelial (LIPG)
hzA800Hu    人妊娠关联血浆蛋白A(PAPPA)ELISA试剂盒原理    ELISA Kit for Pregnancy Associated Plasma Protein A (PAPPA)
hzA399Hu    人高迁移率族蛋白1(HMG1)ELISA试剂盒原理    ELISA Kit for High Mobility Group Protein 1 (HMG1)
hzA397Hu    人转化生长因子β受体Ⅰ(TGFβR1)ELISA试剂盒原理    ELISA Kit for Transforming Growth Factor Beta ReHZptor I (TGFbR1)
hzA396Hu    人性激素结合球蛋白(SHBG)ELISA试剂盒原理    ELISA Kit for Sex Hormone Binding Globulin (SHBG)
hzA395Hu    人抑制素A(INHA)ELISA试剂盒原理    ELISA Kit for Inhibin A (INHA)
hzA580Hu    人水通道蛋白2(AQP2)ELISA试剂盒原理    ELISA Kit for Aquaporin 2, Collecting Duct (AQP2)
hzA578Hu    人水通道蛋白9(AQP9)ELISA试剂盒原理    ELISA Kit for Aquaporin 9 (AQP9)
hzA379Hu    人胰岛素原(PI)ELISA试剂盒原理    ELISA Kit for Proinsulin (PI)
hzA807Hu    人岩藻糖苷酶αL1(FUCα1)ELISA试剂盒原理    ELISA Kit for Fucosidase Alpha L1, Tissue (FUCa1)
hzA557Hu    人甲状腺过氧化物酶(TPO)ELISA试剂盒原理    ELISA Kit for Thyroid Peroxidase (TPO)
hzA380Hu    人血管活性肠肽(VIP)ELISA试剂盒原理    ELISA Kit for Vasoactive Intestinal Peptide (VIP)
hzA393Hu    人P物质(SP)ELISA试剂盒原理    ELISA Kit for SubstanHZ P (SP)
hzA902Hu    人抗酒石酸酸性磷酸酶(ACP5)ELISA试剂盒原理    ELISA Kit for Acid Phosphatase 5, Tartrate Resistant (ACP5)
hzA386Hu    人脂蛋白脂酶(LIPD)ELISA试剂盒原理    ELISA Kit for Lipase, Lipoprotein (LIPD)
hzA821Hu    人C反应蛋白(CRP)ELISA试剂盒原理    ELISA Kit for C Reactive Protein (CRP)
hzA794Hu    人周期素依赖性激酶抑制因子2A(CDKN2A)ELISA试剂盒原理    ELISA Kit for Cyclin Dependent Kinase Inhibitor 2A (CDKN2A)
hzA606Hu    人脑红蛋白(NGB)ELISA试剂盒原理    ELISA Kit for Neuroglobin (NGB)
hzA607Hu    人食欲素A(OXA)ELISA试剂盒原理    ELISA Kit for Orexin A (OXA)
hzA579Hu    人水通道蛋白1(AQP1)ELISA试剂盒原理    ELISA Kit for Aquaporin 1, Colton Blood Group (AQP1)
hzA581Hu    人水通道蛋白3(AQP3)ELISA试剂盒原理    ELISA Kit for Aquaporin 3, Gill Blood Group (AQP3)
hzA582Hu    人水通道蛋白4(AQP4)ELISA试剂盒原理    ELISA Kit for Aquaporin 4 (AQP4)
hzA583Hu    人水通道蛋白5(AQP5)ELISA试剂盒原理    ELISA Kit for Aquaporin 5 (AQP5)
hzA394Hu    人组织因子通道抑制因子(TFPI)ELISA试剂盒原理    ELISA Kit for Tissue Factor Pathway Inhibitor (TFPI)
hzA584Hu    人血红素氧合酶1(HO1)ELISA试剂盒原理    ELISA Kit for Heme Oxygenase 1, Decycling (HO1)
hzA539Hu    人髓鞘碱性蛋白(MBP)ELISA试剂盒原理    ELISA Kit for Myelin Basic Protein (MBP)
hzA585Hu    人细胞周期素D1(CCND1)ELISA试剂盒原理    ELISA Kit for Cyclin D1 (CCND1)