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为什么神经干细胞要悬浮培养?

时间:2017-6-22阅读:3013
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为什么神经干细胞要悬浮培养?

神经干细胞和其他干细胞一样,在体内也是和周围细胞及基质黏附在一起的,这样看来,它应该是贴壁生长的。但为什么我们要悬浮培养呢?是为了抑制其分化?那为什么悬浮的时候它不容易分化,而贴壁反而容易分化呢?

另外,既然神经干细胞在体内黏附生长,那么在体外悬浮培养为什么不会死亡呢(其他的细胞基本都会死亡)?据我所知,能够悬浮培养的细胞主要是(造)血细胞和神经干细胞,而血细胞在体内就是悬浮的,这可以理解,但神经干细胞在体内却不是这样的。

据此,我认为,神经干细胞在体外贴壁生长更符合其在体内的情况,能更好地抑制其分化。当然这需要我们找到一种更好的培养底物。
请结合 Gage FH: Mammalian neural stem cells. Science 2000,287:1433-1438.
Reynolds, B. A. & Rietze, R. L. Neural stem cells and neurospheres — re-evaluating the relationship. Nature Methods 2, 333–336 (2005)两篇综述。
*篇参考文文献虽然是2000年的,但是大牛Gage对体外、体内移植和内源的神经干细胞研究都做了非常富有逻辑性的讨论,告诉我们什么才是神经干细胞,其中的大部分观点对目前的神经干细胞研究还具有非常大的指导意义。
第二篇是神经干细胞悬浮培养的 Reynolds写的,他用自己实验室的数据说明了神经球和神经干细胞的关系,尽管神经干细胞的存在可以用成球实验来检测,但是能够成球并不一定是干细胞。他用事实说明一个细胞能成球甚至二次三次成球也不能代表它就是神经干细胞,在他的系统中,成球细胞的比例为2.4%而实际上干细胞的比例只有0.16%。

另外回答楼主为什么悬浮培养如此重要:
体外培养中,越原始的细胞的代谢要求越低,所以成熟的有功能细胞反而难以维持,培养干细胞首先要筛选出干细胞,而神经干细胞和前体细胞只要给予一定的因子刺激就能在无血清培养基中增殖,而大多数原代的成熟细胞不行。单层贴壁培养也有不少人尝试,也是基于同样的原则,但是方法上都不如悬浮来的成熟。
我觉得不是说神经干细胞一定要悬浮培养,而是神经干细胞培养时,不经过特殊处理,是不会贴壁生长的。可能这就是神经干细胞的体外培养特性,原因可能是其不会分泌黏附介质。

楼主所说的神经干细胞贴壁生长时,我觉得此时已不是单纯的神经干细胞,而是有一部分已经分化为了其它种类的细胞,而其它种类的细胞会分泌一些黏附介质,促使神经球黏附生长。

所以说,如果需要单纯的神经干细胞,还是要悬浮培养,如果需要研究其分化特性,就要使其贴壁生长了。
其实,现在对于神经干细胞的确切定义目前还是有些模糊的,像在国内很多人对stem cell 和progenitor cell 好像统称为干细胞,其实两者在很多方面还是有差异的:增殖能力,细胞浆表达蛋白,膜受体蛋白,离子通道...
记得很久以前在干细胞讨论版块有个帖子中提到:干细胞要称之为干细胞,还有一个zui关键的特点就是:体外扩增后的细胞重新输注体内后,除了能分化为特定的神经细胞外,还必须具有一定的可检测的功能(好像是冷泉港实验室提出的这个观点)

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