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超氧化物歧化酶(SOD)测试盒说明书
一、实验仪器:
试管、微量移液器、旋涡混匀器、恒温水浴锅、可见分光光度计(550nm 波长) 。
超氧化物歧化酶(SOD)测试盒说明书 二、适用范围:
本试剂盒采用黄嘌呤氧化酶法(羟胺法)测定SOD 活力。可测血清(浆)、脑脊液、胸水、腹水、肾
透析液、尿液、红细胞、白细胞、血小板、心肌培养细胞、肿瘤培养细胞、各种动植物细胞、
及亚细胞水平(线粒体、微粒体)中的SOD 活力,并可检测微生物、药物、食品、饮料、化妆品中的
SOD 活力。
三、操作方法:
试 剂 测 定 管 对 照 管
试剂一(ml) 1.0 1.0
样品(ml) a*
蒸馏水(ml) a*
试剂二(ml) 0.1 0.1
试剂三(ml) 0.1 0.1
试剂四(ml) 0.1 0.1
用旋涡混匀器充分混匀,置37℃恒温水浴40 分钟
显色剂(ml) 2 2
混匀,室温放置 10 分钟,于波长 550nm 处,1cm光径比色杯,蒸馏水调零,比色。
注1:a*代表样本取样量和双蒸水取样量;
注2:红细胞中只有CuZn-SOD, 测红细胞中SOD可以参照T-SOD活力的测定。
四、计算公式:
1、血清(浆)、心肌灌流液、肾透析液、细胞培养液中SOD 活力计算:
50% (/ )
SOD
Uml
−
=÷ ××
活力 反应体系的 样本测试前的 对照OD值 测定OD值
对照OD值 稀释倍数 稀释倍数
超氧化物歧化酶(SOD)测试盒说明书
2、组织匀浆中 SOD 活力计算:
50% () ) (/)
SOD
ml Umgprot mgprot ml
=÷ ×÷
组织中 活力 待测样本蛋白浓度 对照OD值-测定OD值 反应液总体积
对照OD值 取样量 (/
3、红细胞中SOD 活力的计算:
1
50) /)
SOD ml
UgHb gHbml
=÷ × ×× ÷
红细胞中 反应液 血红蛋白含量 对照OD值-测定OD值 抽提液总量 % 对照OD值 测定抽提液量 采血量 活力( / 总体积 (
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