水土中亚硝酸盐含量测定试剂盒说明书

水土中亚硝酸盐含量测定试剂盒说明书 
                                                                  分光光度法 50 管/48 样 
注意：正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。 
测定意义 
亚硝酸盐广泛存在于水体和土壤中，不仅是有机氮分解的重要中间产物，也可能来自污
染。人体摄入过量后，可诱发消化系统癌变。 
水土中亚硝酸盐含量测定试剂盒说明书 测定原理 
在酸性条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸反应生成重氮化合物，再与 N-1-萘基乙二胺
形成紫红色偶氮化合物，在 540nm处有特征吸收峰。 
自备实验用品及仪器 
天平、常温离心机、可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿、蒸馏水。 
试剂组成和配制 
提取液：液体 100mL× 1 瓶，室温保存。 
试剂一：液体 25mL× 1 瓶，4℃避光保存。 
试剂二：液体 25mL× 1 瓶，4℃避光保存。 
样品处理 
1.  土壤样品：准确称取过筛后的土壤约 1g，加入2 mL  提取液，室温震荡 1h，8000g，25
℃离心 15min，静置，待其分层后，取上清液待测。 
2.  水样：直接检测；如果浑浊，可以离心后再测定。 
水土中亚硝酸盐含量测定试剂盒说明书 测定步骤和操作表 
  空白管  测定管 
样品（µ L）    1000 
试剂一（µL）  500  500 
试剂二（µL）  500  500 
H2O  1000   
混匀，25℃静置 15min，1mL 玻璃比色皿，空白管调零，测定 A540       
注意：空白管只需测定一次。 
亚硝酸盐含量计算 
标准曲线回归方程为：y= 0.011x + 0.0216，R2
= 0. 9991 
 
（1）土壤样品：NO2
-
（μ moL/g）=（A540 测定管  -0.0216）÷0.011× V 反总÷(V 样÷V 样总
×W)× 10-3
=
11
4
×（A540 测定管  - 0.0216）÷W 
（2）水样：NO2
-
（μ moL /mL）=（A540 测定管  -0.0216）÷0.011× V反总÷V样× 10-3
 
                                                          =
11
2
×（A540 测定管  - 0.0216） 
V样总：加入提取液体积，2mL；V 反总：反应总体积，2 mL；V样：反应中样品体积，1mL；
W：样品质量，g 
注意事项 
1.  试剂盒 2-8℃保存。 
2.  试剂对人体有一定的危害，请穿实验服，戴手套操作。 
 3.  zui低检出限为 1.97μ moL /L。