齐一生物科技(上海)有限公司
免费会员

肌酐(Cr)苦味酸比色法试剂盒-齐一生物

时间:2018/6/21阅读:1414
分享:

肌酐(Cr)试剂盒说明书

For Research Use only

仅供研究用

货号:QYS-239313

苦味酸比色法 96T

  • 测定原理

血浆(血清)除蛋白的上清液中的肌酐与苦味酸产生Jaffe反应,生成桔红色的加成物。

  • 试剂组成与配制:

试剂一:50mmol /L 肌酐标准品应用液 20ml*1瓶,4℃保存3个月。

200mmol /L肌酐标准品贮备液 10ml*1瓶(用于标准曲线制作),4℃保存3个月。

试剂二:钨酸蛋白沉淀剂100ml*2瓶,4℃保存6个月。

试剂三:苦味酸溶液 60ml*1瓶,4℃保存6个月。

试剂四:0.75mol/L 氢氧化钠 60ml*1瓶,4℃保存6个月。

  • 样本前处理:

1、取血清(血浆)0.2ml 加入试剂二(钨酸蛋白沉淀剂)2ml 或者取血清 0.1ml 加试剂二(钨酸蛋白沉淀剂)1ml,充分混匀,3500 转/分,离心 10 分钟,取上清按下表进行测定。

2、尿液标本用双蒸水作 1︰200 稀释后,按下表进行测定。

  • 操作步骤

 

空白管

标准管

测定管

血清(浆)蛋白滤液或稀释尿液(ml)

 

 

1.6

试剂一(50µmol/L 肌酐标准品)(ml)

 

1.6

 

双蒸水(ml)

1.6

 

 

试剂三(苦味酸溶液)(ml)

0.5

0.5

0.5

试剂四(0.75mol/L 氢氧化钠溶液)(ml)

0.5

0.5

0.5

   充分混匀,37℃水浴 10 分钟,取出后流水冷却,波长 510nm,1cm 光径,双蒸水调零, 测定各管吸光度OD值。

  • 计算公式
  1. 血清(血浆)样本:

血清(血浆)肌酐

=

测定OD值- 空白OD值

X

校准品浓度

X

11

*

(mmol /L)

标准OD值- 空白OD值

(50mmol /L)

 

注1:样品测试管测试前的稀释倍数(0.2ml样品加蛋白沉淀液2ml则稀释11倍)。

 

  1. 尿液样本:

尿肌酐

=

测定OD值- 空白OD值

X

校准品浓度

X

201

**

(mmol /L)

标准OD值- 空白OD值

(50mmol /L)

 

注2:尿液测试前用双蒸水1:200稀释。

 

  • 计算举例:
  • 取血清0.2ml加入钨酸蛋白沉淀液2ml,充分混匀,3000转/分离心10分钟,取上清液以及50mmol /L 肌酐标准品应用液按上表进行测定,比色时双蒸水调零,测得结果为空白管吸光度0.018,标准管吸光度0.288,测定管吸光度0.081.计算如下:

血清(血浆)肌酐

=

0.081-0.018

X

50

X

11

=

128.3(mmol /L)

(mmol /L)

0.288-0.018

 

  • 取尿液0.05ml加双蒸水10ml,充分混匀,取稀释液以及50mmol /L 肌酐标准品应用液按上表进行测定,比色时双蒸水调零,测得结果为空白管吸光度0.018,标准管吸光度0.288,测定管吸光度0.270.计算如下

尿肌酐

=

0.270-0.018

X

50

X

201

=

9380.00(mmol /L)

(mmol /L)

0.288-0.018

 

注:1.毫摩尔肌酐与毫克肌酐的换算公式 mg/L=mmol/L*肌酐分子量(113.12)  1mmol/L=1000mmol /L。

2.每个实验室尽量建立自己的参考值,实验用试管必须是实验试管。

 

标准曲线制作

 

  • 标准品前处理

取200mmol /L肌酐标准品用双蒸水稀释成不同浓度:200mmol /L、100mmol /L、50mmol /L、25mmol /L、20mmol /L、12.5mmol /L、10mmol /L、5mmol /L、2.5mmol /L。

 

  • 操作步骤

 

空白管

标准管

不同浓度肌酐标准品(ml)

 

1.6

双蒸水(ml)

1.6

 

试剂三(ml)

0.5

0.5

试剂四(ml)

0.5

0.5

 

  • 实验结果


  • 绘图
    见纸质版说明书 

会员登录

×

请输入账号

请输入密码

=

请输验证码

收藏该商铺

X
该信息已收藏!
标签:
保存成功

(空格分隔,最多3个,单个标签最多10个字符)

常用:

提示

X
您的留言已提交成功!我们将在第一时间回复您~
在线留言