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蛋白裂解液产品简介
采用低浓度的缓冲体系和特殊的添加试剂,使样品快速充分破裂,从而释放蛋白质,内含作用强烈的蛋白酶抑制剂,从而保证了蛋白的活性和完整,同时去除酚和糖类物质。本产品包括裂解液和蛋白酶抑制剂组成。
蛋白裂解液操作步骤
1.根据样品重量(1g新鲜或0.2g的干燥的植物样品加入3mL溶液A、30μL溶液B和30μL溶液C),准备裂解液放在冰上。
2.把样品放在研钵中用液氮研磨,研磨后加入裂解液,在冰上静置(3-4小时),在这期间取出在涡旋震荡器上震荡3-4次, 每次30sec。
3.4℃,12000 rpm(12830g)离心20 min。取上清,分装冻存。
4.样品制备完成,进行SDS-PAGE,垂直板电泳。
蛋白裂解液注意事项
1.进行裂解前时要加入所提供的蛋白酶抑制剂,否则容易蛋白质被降解。
2.裂解液中蛋白样品不有含较高浓度的去垢剂,可以用非干扰型蛋白质定量试剂盒或改良Lowry 法测定蛋白浓度。
3.植物样品要尽量研磨充分,否则裂解不*,同时不要选用含植物纤维较多的植物组织部分作为样品,干燥的植物所提取的蛋白质不能够保证蛋白质的活性。
4.如果植物样品的量比较少,可以按照比例相应减少各种试剂的使用量。
5.使用后,请旋紧瓶盖,防止溶液挥发和与空气的物质发生化学反应。
6.本试剂只能够用于体外实验,不能够用于临床、治疗和动物体内实验等,由此产生的后果,概不承担责任。
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