吖啶橙染色试剂盒-齐一生物

吖啶橙(AO)是一种选择性荧光阳离子染料，它能透过细胞膜，活细胞与死细胞均能被其染色。吖啶橙常用于荧光显微镜和流式细胞仪技术中细胞生理学与细胞周期的分析，该细胞渗透型染色液可与其他很多染色液及方法联合使用。

在荧光显微镜下观察，吖啶橙可透过完整细胞膜，将活细胞的细胞核染成均匀的绿色荧光；而凋亡细胞由于其染色质固缩或断裂为大小不等的片段，吖啶橙将细胞核染成黄绿色亮绿色荧光；死亡细胞呈橙色荧光，但荧光很弱甚至会消失。

试剂盒组成

储存条件

2-8°C 避光保存，有效期为 12 个月。

操作步骤

注意：以下操作适用于大多数细胞类型

1. 使用前请将小瓶离心。

2. 使用前将 10×缓冲液（组分 B）用双蒸水稀释成 1×缓冲液。

3. PBS 洗涤细胞两次后，用适量的 1×缓冲液重悬细胞调整细胞浓度为 10⁶ 个/mL。

注意：贴壁细胞可以在盖玻片上或细胞培养孔中原位染色。 在某些必要情况下，可使用 TritonX-100 进行细胞通透。

4. 取 95 μL 细胞悬液，加入 5 μL AO 染色液，轻柔混匀。

5. 室温避光孵育 1-5 分钟。

注意：较好的染色浓度及培养时间，根据细胞的不同而不同。

6. 取 10 μL 混合液，滴加在一个干净的载玻片上，并加盖盖玻片。

7. 在荧光显微镜下检测 Ex / Em = 488 / 1515nm 处的细胞。

警告！

使用前，请仔细阅读说明书，为了您的安全，请佩戴手套，护目镜，或是其他保护措施。

本试剂盒仅用于研发，不可药用，家庭或其他。