ELISA试剂盒实验血清为何要稀释？有两个原因：
1，比赛克制比照明显，应稀释比赛物；
2，以下降非特异性反应，使特异性的抗原抗体反应充分体现出来。
血清稀释用一般的PBS即可，可加1％的BSA，能有用下降ELISA本底，当然假设你嫌费事我觉得用生理盐水替代PBS联络也不大。不论你是用直接比赛仍是直接比赛，血清的稀释倍数必定要事前断定，但也不用一点点，你做一个预实验即可，选择OD在1.0左右的稀释倍数，即你的ELISA中阴性孔OD在1.0，这么作出来的曲线比照活络。
ELISA试剂盒实验稀释血清的过程：
先把蛋白稀释必定的倍数，比如说10倍、20倍稀释（这么可以大体断定一个参数），将抗原进行一系列稀释包被微量反应板，再用必定稀释度的阳性参看血清和阴性参看血清进行孵育后洗刷，再加酶联络物进行反应，经孵育洗刷后，加底物溶液显色，中止反应后分别测定O.D值，选择O.D值≥1.0的那个抗原稀释度为zui适包被浓度。一般老是要选择那个O.D值稍大于1.0，而不选择小于1.0的抗原浓度。阴性参看血清O.D值恳求<0.1-0.2。也就是恳求阳性参看血清和阴性参看血清的O.D值有明显不同。
ELISA试剂盒是以免疫学反应为根底，将抗原、牽9体的特异性反应与酶对底物的催化作用相联络起来的一种敏感性很高的实验技术。由于抗原、抗体的反应在一种固相载体──聚苯乙烯微量滴定板的孔中进行，每参与一种试剂孵育后，可通过洗刷除去剩下的游离反应物，然后保证实验效果的特异性与稳定性。在实践运用中，通过不一样的规划，具体的方法过程可有多种。