在ELISA试剂盒中双抗体夹心法是检测抗原zui常用的办法,操作过程如下：
1.将特异性抗体与固相载体联结，构成固相抗体。洗刷除掉未结合的抗体及杂质。
2.加受检标本，保温反响。标本中的抗原与固相抗体结合，构成固相抗原抗体复合物。洗刷除掉其他未结合物质。
3.加海标抗体，保温反响。固相免疫复合物上的抗原与酶标抗体结合。*洗刷未结合的酶标抗体。此刻固相载体上带有的酶量与纭本中受检抗原的量相关。
4.加底物显色。固相上的酶催化底物成为有色物。经过比色，测知标本由抗原的量。
在临床查验中，此法适用于检测各种蛋白质等大分子抗原，例如HbsAg、HbaAg、AFP、HCG等。只需取得针对受检抗原的特异性抗体，就可用于包被固相载体和制备酶结合物而树立此法。如抗体的来历为抗血清，包被和海标用
ELISA试剂盒的抗体别离取自不同种属的动物。如使用单克隆抗体，一般挑选两个针对抗原上不同决定簇的单抗，别离用于包被固相和制备酶结合物。这种双位点夹心法具有很髙的特异性，并且能够将受检标本和酶标抗体一同保温反响。