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(辅酶Ⅱ)6磷酸葡萄糖酸脱氢酶(6PGDH)测试盒

参  考  价:面议
具体成交价以合同协议为准

产品型号100管/96样

品牌

厂商性质经销商

所在地上海市

更新时间:2022-07-25 14:50:29浏览次数:617次

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(辅酶Ⅱ)6磷酸葡萄糖酸脱氢酶(6PGDH)测试盒由上海纪宁生物公司提供,包括6PGDH检测试剂盒说明书,免费代测,规格,包装,品牌等关于有关本司测试盒所有产品的详细介绍。

(辅酶Ⅱ)6磷酸葡萄糖酸脱氢酶(6PGDH)测试盒

测定方法:微量法

产品规格:100管/96样

注    意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。

测定意义:

磷酸戊糖途径途径中6-磷酸葡萄糖脱氢酶(G6PDH)和6PGDH依次催化NADPH合成,与能量的平衡、生长速率和细胞活力等密切相关。此外,6PGDH逆境生理中具有重要作用。

(辅酶Ⅱ)6磷酸葡萄糖酸脱氢酶(6PGDH)测试盒

测定原理:

6PGDH催化6-磷酸葡萄糖酸和NADP+生成NADPH,NADPH在340 nm有特征吸收峰,而NADP+没有;通过测定340nm吸光度增加速率,计算6PGDH活性。


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自备仪器和用品:

低温离心机、水浴锅、可调式移液枪、酶标仪、96孔板和蒸馏水。


试剂组成和配制:

提取液:液体100mL×1瓶,4℃保存。

试剂一:液体19mL×1瓶,4℃保存。

试剂二:粉剂×1瓶,-20℃避光保存。

试剂三:粉剂×1瓶,-20℃保存。

粗酶液提取:

1、细菌、细胞或组织样品的制备:

细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104个):提取液体积(mL)为1000~5000:1的比例(建议2000万细菌或细胞加入1mL提取液),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次);8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。

组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。

2、血清(浆)样品:直接检测。

测定操作:

1. 酶标仪预热30min,调节波长到340 nm。

2将试剂二和试剂三转移至试剂一中充分溶解;在37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)水浴10min以上;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。

3. 取96孔板,依次加入10μL样本190μL试剂一,于340nm处测定3min内吸光值变化,第10 s吸光值记为A1,第190s吸光值记为A2。△A=A2-A1

注意:空白管只需要做一次。



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