6磷酸葡萄糖酸脱氢酶(6PGDH)测试盒(辅酶Ⅱ)
测定方法:分光光度法
产品规格:50管/48样
注 意:正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义:
G6PDH(EC 1.1.1.49)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,是磷酸戊糖途径的关键酶,催化 6-磷酸葡萄糖氧化为 6 -磷酸葡萄糖酸内酯,同时将NADP+还原为NADPH,供生物合成及维持细胞内的还原状态用。因此6-磷酸葡萄糖脱氢酶活性的高低可以从一定程度上反映出生物体的生物合成和抗氧化能力。
6磷酸葡萄糖酸脱氢酶(6PGDH)测试盒(辅酶Ⅱ)
测定原理:
G6PDH催化NADP+还原生成NADPH,在340 nm下测定NADPH增加速率。
需自备的仪器和用品:
紫外分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1 mL石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
试剂的组成和配制:
提取液:60mL×1瓶,4℃保存;
试剂一:液体47.5 mL×1瓶,4℃保存;
试剂二:粉剂×1支,-20℃保存;
试剂三:粉剂×1支,-20℃保存;
样本的前处理:
1、细菌、细胞或组织样品的制备:
细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104个):提取液体积(mL)为1000~5000:1的比例(建议2000万细菌或细胞加入1mL提取液),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次);8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
2、血清(浆)样品:直接检测。