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酯酶系列_羧酸酯酶(CarE)测试盒_微量法

参  考  价:面议
具体成交价以合同协议为准

产品型号100管/96样

品牌

厂商性质经销商

所在地上海市

更新时间:2022-07-26 10:44:40浏览次数:1177次

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品牌 纪宁生物 有效期 6个月
货期 现货 用途 仅供科研实验使用
酯酶系列_羧酸酯酶(CarE)测试盒_微量法由上海纪宁生物公司提供,包括CarE检测试剂盒说明书,免费代测,规格,包装,品牌等关于有关本司测试盒所有产品的详细介绍

酯酶系列_羧酸酯酶(CarE)测试盒_微量法

测定方法:微量法

产品规格:100管/96样

注   意 :正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。

测定意义:

哺乳动物CarE,也称脂族酯酶(aliesterase),广泛分布于组织和器官,属于Ser水解酶家族。CarE催化含酯键、酰胺键和硫酯键的内源性与外源性物质水解,但不能催化水解乙酰及其类似物。CarE参与脂质运输和代谢,并且与多种药物、环境毒物以及致癌物的解毒和代谢有关,有机磷农药可结合并且抑制CarE活性。

酯酶系列_羧酸酯酶(CarE)测试盒_微量法

测定原理:

CarE能催化乙酸-1-萘酯生成萘酯,固篮显色;在450 nm光吸收增加速率,计算CarE活性。

自备仪器和用品:

可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96孔板、低温离心机、水浴锅、可调式移液枪和蒸馏水。

试剂组成和配置:

试剂一:液体×1瓶,4℃保存。

试剂二:液体15mL×2瓶, 4℃保存;

试剂三:粉剂×2支, 4℃保存,临用前取1支试剂三,加0.6ml无水乙醇充分溶解;

试剂四:粉剂×2支,-20℃保存,临用前取1支试剂四,加少量试剂二溶解;

工作液配制:临用前配制,向1瓶试剂二中,加入溶解后的试剂三和试剂四各1支,充分溶解,过滤,4℃避光保存,可用1周。

粗酶液提取:

细菌、细胞样品制备

收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照每200万细菌或细胞加入400μL试剂一,超声波破碎细菌或细胞(功率20%,超声3s,间隔10s,重复30次);12000g 4℃离心30min,取上清液待测。

2、组织:按照组织质量(g):试剂一体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL试剂一)进行冰浴匀浆;12000g 4℃离心30min,取上清液待测。

3、液体:直接测定

测定操作:

1. 分光光度计/酶标仪预热30min,调节波长到450 nm,蒸馏水调零。

2. 试剂二置于37℃水浴中预热30 min。

3. 空白管:取微量玻璃比色皿/96孔板,依次加入5μL蒸馏水和200μL试剂二,迅速混匀,于450nm处测定3min内吸光值变化,第10s吸光值记为A1,第190s吸光值记为A2。△A空白管=A2-A1

4. 测定管:取微量玻璃比色皿/96孔板,依次加入5μL上清液和200μL试剂二,迅速混匀,于450nm处测定3min内吸光值变化,第10s吸光值记为A3,第190s吸光值记为A4。△A测定管=A4-A3

注意:空白管只需测定一次。

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