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谷-氨酸脱氢酶(GDH)测试盒_氮代谢系列

参  考  价:面议
具体成交价以合同协议为准

产品型号50管/48样

品牌

厂商性质经销商

所在地上海市

更新时间:2022-07-29 16:12:25浏览次数:1061次

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品牌 纪宁生物 货期 现货供应
有效期 6个月 用途 仅供科研实验使用
谷-氨酸脱氢酶(GDH)测试盒_氮代谢系列由上海纪宁生物公司提供,包括GDH检测试剂盒说明书,免费代测,规格,包装,品牌等关于有关本司测试盒所有产品的详细介绍



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谷-氨酸脱氢酶(GDH)测试盒_氮代谢系列

测定方法:分光光度法

产品规格:50管/48样

注    意: 正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定

测定意义:                           

GDH(EC 1.4.1.2)广泛分布于植物中,和谷-氨酸合成酶(GOGAT)共同参与谷-氨酸的合成,在氨同化和转化成有机氮化合物的代谢中起重要作用。

测定原理:

GDH催化NH4+、α-酮戊二酸和NADH,生成谷-氨酸和NAD+,引起340nm吸光度下降。通过测定340nm吸光度的下降速率,计算GDH活性。

需自备的仪器和用品:

紫外分光光度计、台式离心机、水浴锅、移液器、1mL石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水。

试剂组成和配制:

提取液:液体60mL×1瓶,4℃保存;

试剂一:液体60mL×1瓶,4℃保存;

试剂二:粉剂×2瓶,4℃保存;

谷-氨酸脱氢酶(GDH)测试盒_氮代谢系列

粗酶液提取:

细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104个):提取液体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1mL提取液),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次);8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。

组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。

血清(浆)样品:直接检测。

测定步骤:

1、分光光度计预热30min以上,调节波长至340nm,蒸馏水调零。

2、样本测定

(1)在试剂二中加入25mL试剂一充分溶解混匀,置于37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)水浴5min;现配现用(配好后12h内用完);

(2)取0.05mL样本和0.95mL工作液于1mL比色皿中,混匀,加工作液的同时开始计时,在340 nm波长下记录20秒时的初始吸光度A1和5分20秒时的吸光度A2,计算ΔA=A1-A2。

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