江苏晶美生物科技有限公司

牛血清蛋白介绍

时间:2015-8-3阅读:875
分享:


血清白蛋白的相对分子质量为104次方这个级别,它不是一定的,而是多聚物的,有的地方测试

数据为70 000,这一数据是在做PCR的时候使用的数据。

牛血清白蛋白是血液中的主要成分(38g/100ml),分子量68kD,等电点4.8,含氮量16%,含糖量0.08%,仅含已糖和已糖胺,含脂量只有0.2%。白蛋白由581个氨基酸残基组成,其中35个半*组成17个二硫键,在肽链的第34位有一自由巯基。白蛋白可与多种阳离子、阴离子和其他小分子物质结合。

牛血清蛋白溶液可以作为测量蛋白质含量的标准曲线用。

一般买回来的牛血清蛋白是细小片状的乳白色粉末。牛的血清蛋白也以铁为基本原料。[1] 

用途

1、特纯级牛血清蛋白

用途:用作酶标、金标等诊断试剂的封闭剂,生化试验等。

性状:淡黄色干燥粉末

2、无脂肪酸牛血清蛋白

用途:用作酶标、金标等诊断试剂的封闭剂、保护剂,尤其适用于容易受脂肪酸影响的产品和试验。

性状:淡黄色干燥粉末

3、无蛋白酶牛血清蛋白

用途:用于酶标、金标等诊断试剂的封闭剂、保护剂,尤其适合血液脂类的诊断试验、脂类诊断试剂及对纯度要求高的产品。

性状:淡黄色干燥粉末

4、细胞培养级牛血清蛋白

用途:无血清培养基的蛋白添加剂,供细胞培养使用。

性状:淡黄色干燥粉末白蛋白[1] 

测定

标准曲线

一般用分光光度法测物质的含量,先要制作标准曲线,然后根据标准曲线查出所测物质的含量。因此,制作标准曲线是生物检测分析的一项基本技术[2] 

测定方法

1. 凯氏定氮法

2. 双缩脲法

3. Folin-酚试剂法

4. 紫外吸收法

5. 考马斯亮蓝法[1] 

标准曲线制作

试剂

1. 考马斯亮蓝试剂:

考马斯亮蓝G—250 100mg溶于50ml 95%乙醇,加入100ml 85% H3PO4,用蒸馏水稀释至1000ml,滤纸过滤。zui终试剂中含0.01%W/V)考马斯亮蓝G—250,4.7%W/V)乙醇,8.5%W/VH3PO4

2. 标准蛋白质溶液:

纯的牛血清血蛋白,预先经微量凯氏定氮法测定蛋白氮含量,根据其纯度同0.15mol/LNaCl配制成100ug/ml蛋白溶液。[1] 

器材

1. 722S型分光光度计使用及原理。

2. 移液管使用。[1] 

制作步骤

试管编号 0 1 2 3 4 5 6

100ug/ml标准蛋白(ml 0.0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6

0.15mol/L NaCl ml 1 0.9 0.8 0.7 0.6 0.5 0.4

考马斯亮蓝试剂 ml 5 5 5 5 5 5 5

摇匀,1h内以1号管为空白对照,595nm处比色

3、以A595nm为纵坐标,标准蛋白含量为横坐标(六个点为10ug20 ug30 ug40 ug50 ug60 ug),在坐标轴上绘制标准曲线。

1)、利用标准曲线查出回归方程。

2)、用公式计算回归方程。

3)、或用origin作图 ,测出回归线性方程。即A595nm=a×X( )+6

一般相关系数应过0.999以上,至少29以上。

(4)、绘图时近两使点在一条直线上,在直线上的点应该在直线两侧。[1] 

含量的测定

样品即所测蛋白质含量样品(含量应处理在所测范围内),依照操作步骤1操作,测出样品的A595nm,然后利用标准曲线或回归方程求出样品蛋白质含量。

一般被测样品的A595nm值在0.1—0.05之间,所以上述样品如果A595nm值太大,可以稀释后再测A595nm值,然后再计算。[1] 

注意事项

1. 玻璃仪器要洗涤干净。

2. 取量要准确。

3. 玻璃仪器要干燥,避免温度变化。

4. 对照:用被测物质以外的物质作空白对照。


会员登录

×

请输入账号

请输入密码

=

请输验证码

收藏该商铺

X
该信息已收藏!
标签:
保存成功

(空格分隔,最多3个,单个标签最多10个字符)

常用:

提示

X
您的留言已提交成功!我们将在第一时间回复您~

以上信息由企业自行提供,信息内容的真实性、准确性和合法性由相关企业负责,环保在线对此不承担任何保证责任。

温馨提示:为规避购买风险,建议您在购买产品前务必确认供应商资质及产品质量。

在线留言