当前位置:上海酶联生物研究所>>技术文章>>今日课堂:小细胞之大微妙
1.收到细胞,时间要镜检:调查细胞形态是否正常,关于贴壁细胞则要注意看贴壁状况是否很好,调查细胞密度,有疑议及时咨提供细胞的技术人员。因为运送的时间或许温度的变化,许多贴壁细胞在盛满培养基的瓶子里成长的状况平和时会有点不一样,主要是贴壁结实问题。
2.当通过上一步的调查,细胞初步没有任何问题时,进行下一步操作。当收到的细胞密到达80%左右时,则处理如下:弃除瓶中大部分培养基,仅保留5到10mL培养所需的惯例培养基;或替换新鲜的培养基,置于培养箱中,随后每天调查。细胞在低于正常成长温度状况下,会调整为停止期,或许慢速成长期,必须恢复37度的环境至少3个小时左右,才干重新调整到接近对数成长期的状况,在对数成长期进行细胞的传代会大大添加传代的成功率,和细胞的存活率。
3.如果经步调查发现细胞密度超越90%,而且细胞状况很好时,则复温后2个小时需求立即传代。传代的比例应依据不同的细胞而定。关于成长比较快,状况安稳,不易受外界影响的细胞可以一次多传几瓶。
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