寡核苷酸与抗体的结合
连接用的抗体可以是特异性一抗，也可以是第二抗体或其他的连接二抗，如抗（Dig）、抗荧光素（FITC）或抗*（biotin）二抗。

1．抗体的脱盐和活化
首先对抗体免疫球蛋白进行脱盐，然后进行抗体活化。在41 nmol抗体分子中加入410mmol的GMBS[硫代—N—（4—马来酰亚胺丁酰）硫代丁二酰亚胺，sulfo-N-（4—maleim—idobutyryloxy）sulfosuccinimide]，暗处，37℃，在氮气中30 rain，移人室温中继续反应30min，用PD-10色谱柱（用pH7．5 PBS平衡柱子）除去多余的磺化—GMBS，将活化抗体4℃浓缩。此时每一个抗体分子中含有多个马来酰亚胺，可以用Ellman’s试剂滴定活化抗体的量，主要测定抗体分子上的巯基。抗体活化后与寡核苷酸连接。

2．活化抗体与寡核苷酸结合
将28．1nmol磺化GMBS活化抗体和142 nmol5硫醇寡核苷酸混合，总体积为825ul，室温中反应2h，随后移人4℃中反应过夜。

3．纯化结合物
纯化结合物一般先用阴离子交换色谱柱Q—sepharose（先用梯度盐洗柱，然后加样，洗脱，收集结合物），再用SephadexG-200色谱柱除去游离的寡核苷酸。纯化后结合物中寡核苷酸和抗体之比为10：1，多数情况下，1个抗体分子可结合3～5个寡核苷酸。