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1. 固定
用4%的多聚甲醛固定液。对于冰冻切片，甲醛固定有时比冰冻丙酮好；但对于不同的组织和抗原，可选用不同的固定液。 有时候商品化的抗体会有比较适合而推荐的固定液，请于购置前注意说明书。
（1）BouinS固定液：饱和苦味酸750ml，甲醛250ml，冰醋酸50ml，其对组织的穿透力较强，固定较好，结构完整，但因偏酸，对抗原有一定损害，且组织收缩明显，不适于组织标本的长期保存。
（2）PLP液：即高碘酸钠-赖氨酸-多聚甲醛，适于固定石蜡切片。适于富含糖类组织，对超微结构及许多抗原的抗原性保存较好。
2. 组织脱水、透明
时间不能太长，否则在切片时容易碎片，切不完整。
3. 切片时展片
有些组织在切片后难以在水中展开，这时可适当地在水中加入几滴乙醇。
4. 烤片
60℃ 30分钟或37℃ 过夜，温度太高或时间太长，抗原容易丢失。
5. 蜡块及切片的保存
在4℃保存
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