神经胶质细胞是广泛分布于中枢神经系统内的，除了神经元以外的所有细胞。具有支持、滋养神经元的作用，也有吸收和调节某些活性物质的功能。可分为少突胶质细胞(oligodendrocyyte)、星形胶质细胞(astrocyte)、施万细胞和小胶质细胞四种。神经胶质细胞有分裂的能力，故可进行传代培养。

少突胶质细胞的培养

    少突胶质细胞是中枢神经系统的髓鞘形成细胞，它起源于胚胎神经管的神经上皮细胞，随着中枢神经系统的发育，逐步迁移到白质，并增殖、分化，形成髓鞘包裹轴突。

1．材料

(1)材料来源：新生1周内SD大鼠的脑组织。

(2)手术器械：解剖剪、解剖镊、眼科剪和*。

(3)培养皿和盖玻片：用O．01％PLL包被盖玻片，置温箱中烘干，使用前放入培养皿中。

(4)分离液：将9ml Percoll原液和lml10×HBSS混合后，用lOml HBSS稀释。

(5)消化液：1％*。

(6)培养液：DMEM／F12混合培养液，添加15％FBS、6g／L葡萄糖、10万I U／L*和100mg／L*。

2．方法

(1)取材：通过颈动脉放血处死大鼠，无菌条件下取大脑，置人PBS液中，在解剖显微镜下剔除脑膜及血管，分离出大脑皮层。

(2)消化：将大脑皮层剪碎，加入1％*，37℃水浴中振荡消化30min。加入2ml FBS终止消化，离心(1000r／min，10min)。

(3)细胞悬液制备：吸去上清液，用HBSS洗涤细胞2次，再用：100目滤器过滤。在滤液中加入HBSS，至20ml，制成细胞悬液。

(4)收集细胞：在50ml离心管中加入分离液，将10ml细胞悬液铺在分离液的上面。在4℃条件下，离心(14000r／min，45min)。离心管中的液柱自上而下呈现三层，即髓鞘层、少突胶质细胞和星形胶质细胞层、红细胞层。收集靠近髓鞘层的少突胶质细胞。用2倍体积的HBSS稀释，离心(2000r／min，10min)。

(5)培养细胞：吸去上清液．用HBSS混悬细胞，离心(1000r／min，10min)。用培养液混悬沉淀细胞，使细胞充分分离，然后以1×106的密度接种于预先涂有多聚赖氨酸的培养瓶中，置于37℃、5％CO2培养箱中，3d换液一次。

3．结果观察培养的细胞中95％以上为少突胶质细胞。培养24h后，大部分少突胶质细胞已贴壁生长。少突胶质细胞的胞体较小，呈圆形或三角形。胞质少，核较大而圆，核仁不明显。大多数细胞具有典型的双极或三极突起，细胞突起短，分支较少。若在培养液中使用有丝分裂抑制剂，少突胶质细胞在体外培养可达2个月。可用半乳糖脑苷脂免疫细胞化学染色及髓鞘碱性蛋白免疫细胞化学染色等方法鉴定少突胶质细胞。

4．注意事项少突胶质细胞膜上半乳糖脑苷脂的出现与少突胶质细胞发育的状态有关，如果培养物取材于出生前的胚胎神经细胞，则只有在体外培养7～lOd后才能表达半乳糖脑苷脂。