(1)抗噬菌体菌株的选育

①高浓度噬菌体原液的制备选育抗噬菌体菌株需要相应的专一性噬菌体作为选择性因子，因此，选育抗噬菌体菌株，必须首先制备高浓度的噬菌体原液。而制备高浓度的噬菌体原液．首先要分离获得噬菌体，并纯化，然后制备高浓度的噬菌体原液。ELISA试剂盒

专一性噬菌体的获得和纯化：在培养皿上挑取被噬菌体感染后形成的噬菌斑，移接到吉有1％蛋白胨培养液中培养，然后用双层琼脂法进行多次连续分离，直至出现的噬菌斑形状大小基本一致。

价噬菌体原液的制备：将已纯化的噬菌体接种到处于对数期的敏感菌培养液中，继续培养10h左右，此时已有较多噬菌体释放。将培养液离心，取含有噬菌体的上清液，再次接种到处于对数期的敏感菌培养液中，继续培养后，用细菌滤器过滤，即得到价噬菌体原液。

噬菌体原液效价测定：效价指每毫升液体中含有噬菌体的数量，通常用“U/mL”表示。具体做法是用1％蛋白胨溶液作为稀释剂，稀释后用双层琼脂法进行定量测定，计算公式如下：

效价=平均每皿噬菌斑数×稀释倍数×取样量折算ELISA试剂盒

②诱变与噬菌体抗性菌株的分离 单孢子悬浮液经诱变后涂布在含有噬菌体的平板上筛选噬菌体抗性菌落。

③液体摇瓶振荡培养 从含有噬菌体的平皿上筛选得到的抗性菌株，要进一步进行液体摇瓶振荡培养。在摇瓶培养至对数期时，加入一定量的价噬菌体原液．继续培养，观察菌体消失，而后又重新再生。此时将再生菌体移入新的培养基中，继续培养至对数期，加入价噬菌体原液，再培养。如此反复3～4次后，再将其分离到含噬菌体的平皿上，挑取单菌落移人斜面，并在斜面上滴加噬菌体原液，培养后观察滴加噬菌体原液处的菌落生长情况。选取生长正常的菌体细胞，再进行摇瓶复筛。经观察和测定，选取生长正常、产物产量高的菌株，保存。

④进一步考察抗性菌株对周围环境中存在的各种噬菌体的抗性。

(2抗性菌株的特性研究

①抗性菌株稳定性试验稳定性是指已选育到的抗性菌株对噬菌体的抗性是否稳定以及经过传代后的抗性菌株对噬菌体的抗性是否稳定。选育到的抗性菌株要分别接种到含有高浓度噬菌体的斜面培养基、种子培养基和发酵培养基进行培养，然后采用双层琼脂法测定。如不出现噬菌斑，说明抗性是稳定的。对选育到的抗性菌株，还要进行传代试验，传代后再用上述同样方法测定其对噬菌体的抗性。

    在实际工作有时会把由溶源性引起的免疫性误认为是抗性。因此，要区分溶源性菌株与抗性菌株。常采用诱变因子诱导菌株的方法来区分，如是溶源性菌株，则可释放噬菌体；如是抗性菌株，则不会出现这种现象。

②抗性菌株的产量性能抗噬菌体菌株，除对噬菌体的抗性要求外，其产量要求保持与敏感菌株相同或者更高。

    因为对噬菌体的抗性是由基因突变引起的，所以抗噬菌体菌株在代谢过程中某些酶的活性也可能会有所改变．即抗性菌株的发酵特性可能会发生变化。因此，需要对抗噬菌体菌株的培养基和培养条件进行优化，使抗性菌株能发挥zui大的生产能力。ELISA试剂盒