细胞增殖过程中必伴有DNA复制，3 H标记的胸腺嘧啶脱氧核苷(TdR)掺人到新合成的DNA中，随细胞增殖，带有标记的DNA均匀分布到子代细胞中。此时，测定培养细胞中3 H的放射性强度，即可反映细胞的代谢和增殖情况。

(一)材料

1．待测(受试后)细胞悬液，浓度调至5×105／ml。

2．10％～15％FBS RPMI 1640培养液。

3．3 H—TdR溶液．用细胞培养液配制，浓度为1μCi3H-TdR／μl。

4．闪烁液。

5．24孔(或96孔)培养板。

6．闪烁计数器。

(二)方法

1．在培养板各孔中加入O．1ml或O．2ml细胞悬液，37℃CO2培养箱中培养2～2．5d。

2．每孔加入含有1μCi3H-TdR新鲜细胞培养液，继续培养4～18h。弃去培养液，PBS洗涤2～3次，清除未掺人同位素。

3．将细胞消化后，用细胞样品收集器将各孔中细胞分别收集于玻璃纤维滤纸上，56℃烘烤2h，使其干燥。

4．将收集各孔细胞滤纸分别放人一个闪烁测定瓶中，加入3～5ml闪烁液，用闪烁计数器测定每分钟脉冲数(counts per minute，CPM)，记录每孔(约5×104个)细胞的CPM值。

(三)结果分析

    被标记的细胞是处于分裂期s期的细胞。[3 H]一TdR掺人量反映DNA合成的快慢。

(四)注意事项

3 H同位素具有放射损伤作用，实验应在的放射性实验室内，按照相关的放射性实验操作规程进行。