酵母菌是单细胞的真核微生物。酵母菌的有性繁殖是通过形成单倍体的子囊孢子的方式进行的。酵母菌存在单倍体和二倍体的生活史，具有孟德尔式的分离现象，以及a和a接合型．具有这两种接合型的子囊孢子萌发生长成单倍体的菌株，不同接合型的单倍体菌株细胞可以接合生成二倍体菌株。酵母菌二倍体的生活力较单倍体强，生产能力也明显高于单倍体，因此通过杂交得到二倍体，有可能达到育种的目的。

    酵母菌的杂交主要是通过有性杂交，有性杂交是利用两种不同接合型的单倍体菌株或子囊孢子进行的。有的酵母菌如假丝酵母不具有性生殖，即不产生子囊孢子，它们的杂交与霉菌一样，是通过准性生殖过程进行的。酵母菌杂交一般指异接合型菌株的杂交。杂交过程包括子囊孢子接触、接合、合子形成．直至二倍体细胞出芽为止的一系列过程。杂交步骤包括遗传标记菌株的选择和不同遗传标记的异接合型细胞杂交。

1.标记亲株的选择

    酵母菌杂交育种的亲株要求携带遗传标记，常用的遗传标记为营养缺陷型或抗性突变型，也可以是菌落和细胞的形态。选择标记亲本菌株一般是先选择遗传性状优良的原始亲本，然后从两个原始亲本中选出不同接合型的单倍体菌株或者单倍体的子囊孢子，采用适合的诱变剂处理单倍体菌株，从中获得带有不同营养缺陷基因的亲本菌株作为杂交的直接亲本。

2.杂交方法

(1)子囊孢子的制备酵母菌二倍体细胞在营养贫乏的产孢子培养基上培养可形成子囊孢子。通常子囊孢子不易分离，可用蜗牛酶处理，振荡，加液体石蜡，摇匀后子囊孢子就聚集于液体石蜡层中；或洗下子囊．加液体石蜡和硅胶土，研磨，4500r／min离心10min，破壁后被分离的子囊孢子集中到石蜡层。取含有子囊孢子的石蜡，再加人等量的15％明胶．混匀后涂布到琼脂平板上培养，即可得到单倍体菌落，移人斜面，备用。

    酵母菌单倍体细胞与二倍体细胞在形态上存在一定的区别。二倍体细胞较大，呈椭圆形；菌落大且形态较一致；液体培养繁殖快，细胞较分散；在孢子培养基上可形成子囊。而单倍体细胞较小，呈球形；菌落小并且形态多变；液体培养时繁殖慢，细胞聚集成团；在孢子培养基上不形成子囊。单倍体细胞具有接合能力，但不能形成孢子。根据在产孢子培养基上能否形成子囊孢子可以确定是否为单倍体细胞。将单倍体菌株与已知接合型a或a标准单倍体细胞杂交，确定单倍体细胞的接合型。

(2)有性杂交 酵母菌有性杂交的方法主要有孢子杂交法、群体杂交法和单倍体细胞杂交法三种。

①孢子杂交法在显微操作器下．取单个子囊孢子．随机配对，置于微滴培养液中培养，子囊孢子发芽并发生接合，形成接合子。

②群体杂交法把带有遗传标记的两种不同接合型单倍体细胞移接到*培养液中，混合培养过夜，使两亲本细胞在生长中充分接合，然而把混合液分离在选择培养基或基本培养基上，培养后形成二倍体的杂种菌落。

③单倍体细胞杂交法将两种不同接合型的单倍体细胞在显微操作器下随机配对，进行微滴培养。在显微镜下可直接观察杂合子形成，并可在无遗传标记的情况下获得杂合二倍体细胞。

    酵母菌和其他微生物杂交一样，种间杂交比属间杂交容易获得优良性状的重组体。这是因为种问杂交的遗传特性比较稳定，而属间杂交产物易于发生遗传分离造成的。