骨胶囊处方是由骨碎补、淫羊藿和没药等八味 药材经提取后制成的胶囊剂，具有补肾强骨、续伤止 痛的功效。骨碎补在该处方中为君药，其所含黄酮类 化合物柚皮苷为其指标成分。测定柚皮苷含量的方 法文献报道较多I1 ]，我们参考中国药典中柚皮苷的 液相色谱含量测定方法[5]，对制剂中骨碎补所含 柚皮苷进行了测定。通过方法学验证实验以及多批 样品的含量测定结果显示，该法简便易行，可用于该 制剂的质量控制。

1 仪器与试药

1．1 仪器 液相色谱仪，SPD-20AVP型紫外 检测器(日本岛津)；LC_2OATVP*(日本岛 津)，浙江大学N200O色谱工作站；电子天平FA2004 (上海精密科学仪器有限公司)。

1．2 试药 柚皮苷对照品由中国药品生物制品检定 所提供(供含量测定用，批号110722—2OO309)。壮骨 胶囊(自制)。试剂为分析纯，水为双蒸水，甲醇为色 谱纯。

2 方法与结果

2．1 色谱条件 色谱柱：Phenomenex ODS柱(250 mmX4．6 mm，5,urn)；流动相：甲醇一醋酸一水(37：2： 61)；检测波长：283 nm；流速：1．2 mL·rain_。；柱温： 室温。理论板数按柚皮苷峰计算不低于3 000，色谱 图见图1。

2．2 对照品溶液的制备取经过110℃ 干燥至恒重 的柚皮苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1 mL 中含0．08 mg的溶液，即得。

2．3 供试品溶液的制备取1O粒胶囊的内容物，研 细并混和均匀；精密称取1．0 g，置三角瓶中，加甲醇 30 mL，置于超声波振荡器中，超声提取30 min，放冷，滤过，蒸干；残渣用甲醇溶解并转移到1O mL的量瓶 中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

2．4 方法学考察

2．4．1 线性关系实验精密吸取制备好的柚皮苷对 照品溶液(质量浓度为0．092 g·L )2，4，6，8和1O 肚L，分别注入液相色谱仪，按照上述拟定的色谱 条件测定峰面积，以峰面积的积分值(y)对对照品的 质量浓度(X)进行回归分析，得到其回归方程为Y一 172 1】5 X + 43 318，r 一0．999 5 实验结果表明柚皮苷对照品在0．184~0．920 g·L- 的质量浓度范围内，柚皮苷进样量与峰面积呈现良好 的线性关系。

2．4．2 精密度实验 精密吸取柚皮苷对照品溶液 1O L，按上述拟定的色谱条件进样6次，测得柚皮苷 对照品峰面积积分值的RSD值为0．9 。

2．4．3 稳定性实验取同一批次*，制备样品 溶液，按上述拟定的色谱条件每隔2 h进样1次，共4 次，测得柚皮苷的峰面积RSD值为1．2 ，实验结果表 明，制备的样品溶液在8 h内稳定性良好。

2．4．4 重现性实验取同一批次*，按拟定 供试品溶液制备方法制备样品溶液6份，分别按上述拟定的色谱条件进样测定，其RSD为1．6 ，结果表 明此方法的重现性良好。

2．4．5 回收率实验精密称取已知含量的同批次样 品0．5 g，共6份，每份均分别精密加入柚皮苷对照品 溶液，按拟定的供试品溶液制备方法制备供试品溶液 共6份，按上述拟定的色谱条件测定样品的柚皮苷含 量，分别计算回收率，其平均回收率为99．1 ，RSD 为1．9 。

2．5 样品测定取不同批次样品，按拟定的供试品 溶液制备方法制备供试品溶液，按上述拟定的色谱条 件测定峰面积积分值，计算6批样品中柚皮苷的含 量，结果分别为0．36，0．39，0．32，0．41，0．40和0．38 mg·粒_。

3 讨论

曾选乙醇、体积分数70 乙醇和甲醇为提取溶 剂，比较了冷浸提取、回流提取和超声提取3种方法， 结果表明甲醇的提取效果比乙醇好，由于该制剂为原 料药经提取浓缩后的胶囊剂，所以用简便的超声处理 就可将制剂中柚皮苷提取*。通过对超声提取时 间的考察实验，结果显示，样品采用超声提取30 min 后，柚皮苷已提取*，因此确定样品处理以甲醇为 溶剂，采用超声处理30 min后制备供试品溶液。