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核酸提取及纯化试剂盒使用核酸提取试剂前:
将蛋白酶K溶剂移入含有蛋白酶K冻干粉中,混匀。
拭子提取步骤:
拭子干采加0.6ml CY1液体,10ul蛋白酶K,混匀,放置于65℃空气培养箱培养30min(或湿采:装有拭子加保存液的样本离心管在12000 rpm条件下离心1分钟,保留沉淀,去除上清液。加0.6ml CY1液体,10ul 蛋白酶K,混匀,放置于65℃空气培养箱培养30min。
去掉拭子,1200rpm离心1min。
取出全部上清到新的离心管,做实验。
加入0.25mlCY-2液体,10ul磁珠(使用前摇匀),混匀12min,放置在磁力架上静置30s,吸掉液体。
加入0.6mlCY-3液体,混匀3min,放置在磁力架上静置30s,吸掉液体。
加入0.6mlCY4液体,混匀3min,放置在磁力架上静置30s,吸掉液体。
重复步骤2.6.
室温干燥10-20min,加50ulCY5液体洗脱。混匀,放置在磁力架上静置30s,转移液体到新的离心管。
测OD
唾液提取步骤:
唾液加保存液混合液1200rpm离心管1min;
保留沉淀,去除上清液;
往里面加入0.6mlCY1液体和10ul蛋白酶K,混匀,放置于65℃空气培养箱培养30min;
1200rpm离心1min,取出全部上清到新的离心管,加10ul磁珠和0.25mlCY2,混匀12min,放置在磁力架上静置30s,吸掉液体。
加入0.6mlCY3液体,混匀3min,放置在磁力架上静置30s,吸掉液体。
加入0.6mlCY4液体,混匀3min,放置在磁力架上静置30s,吸掉液体。
重复步骤⑥
室温干燥10-20min,加入50ulCY5液体洗脱,混匀,放置在磁力架上静置30s,转移液体到新的离心管
测OD
注:如需除RNA,可自行配制RNaseA10mg/mL:溶剂(10mm乙酸钠:ph5.0),煮沸15min,用Tris-Hcl调ph7.5,于-20℃保存。
使用核酸提取或纯化试剂注意事项:
本产品仅用于体外诊断。
保存环境和提取步骤应严格按照说明书的说明。
提取时如发现量偏少,可适当增加样本量或增加提取次数。
提取的DNA必须保证新鲜,及时实验。
注:本提取试剂用于体外诊断之用,不可用于人体或动物内服外用。若吞食可导致严重事件;对眼睛和皮肤有一定的刺激性,若不慎溅入眼睛即用清水冲洗。使用时应当保持通风。
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