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体外定向进化技术：DNA改组
2009-12-31 阅读(3297)
DNA改组（DNA shuffling）是目前zui方便、有效的一种分子水平的体外定向进化技术，该技术同倾向错误PCR （Error-prone PCR） 相结合，通过对单基因或相关基因家族的靶序列进行多轮随机诱变、重组和高通量的筛选，可以有效富集正突变，去除负突变，提高突变文库的丰度，创造新基因和获得期望功能的蛋白质。来自湖南师范大学生命科学学院微生物分子生物学湖南省重点实验室的研究人员对这一重要技术进行了总结和展望，并提出了DNA改组的创新，发展和改组过程中应当注意的问题。
DNA改组由由美国的Stemmer于1994年首先提出，经后人的不断创新和改进，现已发展成为比较完善的技术体系。作为一种高通量的突变和筛选技术，不仅可以实现基因序列的点突变，还可以实现其它突变技术不能实现的基因片段插入、缺失、倒转和整合等，而且可以反复改组，实现突变的优势积累效应。
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