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ELISA曲线怎么拟合呢?

2021-3-24  阅读(2925)

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有很多客户向我们咨询ELISA实验后如何进行曲线制作?那么对于那么多的曲线计算公式,该如何选择*的拟合方程呢?今天上海劲马的技术员就给大家总结下:ELISA曲线拟合的那些事。

我们一般可以用软件绘制也可以通过excel进行制作。按照科学分析方法,如果存在奇异点或者污点,直接采用线性分析不是很好,要对拟合曲线的几个点进行取舍,同时也可以改用双对数直线拟合或者四参数曲线拟合。

那么常用的曲线拟合回归方程主要为以下几种:

第yi种是直线回归:直线回归是简单的回归模型,也是zui基本的曲线拟合回归分析方法,将所有的测试点拟合为一条直线,其拟合函数方程式为:y=a+bx。但是因为实际实验中线性*的情况下可能直线回归可以获得较为理想的R2值。那么如果直线线性不理想的情况下如何拟合?

作为拥有十多年ELISA产品生产经验的企业,我们会推荐用户进行多项式拟合来改善直线回归线性不理想的问题。

二次多项式拟合回归方程:二次多项式成抛物线状,开口向下或者向上,在很多ELISA实验中,拟合近似于二次多项式的升段或者降段,所以使用二次多项式拟合时,保证取值的范围都落在曲线的升段或者降段。其拟合函数方程式为:y=ax2+bx+c


对数拟合回归方程:我们将标准品的O.D测值设为x轴,标准品浓度的对数作为y轴,浓度是自变量,O.D.值是因变量进行曲线拟合。

四参数拟合回归方程:竞争法和夹心法都可以用到。它的形状,根据情况,可能是一个单调上升的类似指数,对数,或双曲线的曲线,也可能是一个单调下降的上述曲线,还可以是一条S形曲线。它要求X值不能小于0(因为指数是实数,故有此要求)。在很多情况下它都可以拟合ELISA的反应曲线,所以它也成了ELISA中应用比较广的模型之一。

曲线拟合方法虽多,要根据不同类型ELISA本身的特点,选择比较适合的曲线拟合模型,才能得到合理的实验结果。一般情况下,需要综合考虑标准曲线的趋势走向以及R值的大小以及样本落值情况。

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