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酶联免疫吸附法详细介绍

2015-7-29  阅读(1739)

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酶免疫测定(enzyme immunoassay, EIA)或免疫酶技术(immunoenzymatic technique)是指用酶标记抗体或酶标记抗体进行的抗原抗体反应。它采用抗原与抗体的特异反应与酶连接,然后通过酶与底物产生颜色反应,用于定量测定。目前常用的方法称为酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA),其方法简单,方便讯速,特异性强。ELISA是由抗原(抗体)先结合在固相载体上,但仍保留其免疫活性,然后加一种抗体(抗原)与酶结合成的偶联物(标记物),此偶联物仍保留其原免疫活性与酶活性,当偶联物与固相载体上的抗原(抗体)反应后,再加上酶的相应底物,即起催化水解或氧化还原反应而呈颜色。其所的颜色深浅与欲测的抗原(抗体)含量成正比。
 
酶联免疫吸附法

 ELISA. 1. Antigen in saline is incubated on a plastic plate or tube, and small quantities become absorbed onto the plastic surface. 2. Free antigen is washed away. (The plate may then be blocked with excess of an irrelevant protein to prevent any subsequent non-specific binding of proteins). 3. Test antibody is added, which binds to the antigen. 4. Unbound proteins are washed away. 5. The antibody is detected by a ligand. The ligand is a molecule which can detect the antibody and is covalently coupled to an enzyme such as peroxidase. 6. This binds the test antibody and after free ligand is washed away. 7. The bound ligand is visualized by the addition of chromogen-a colourless substrate which is acted on by the enzyme portion of the ligand to produce a coloured end-product. 8. A developed plate is shown in the lower panel. The amount of test antibody is measured by assessing the amount of coloured end-product by optical density scanning of the plate.

酶联免疫(ELISA)送检服务
实验项目:酶联免疫(ELISA)指标检测
客户提供材料:人/动物等的血清、尿液、细胞培养液或人/动植物等组织、细胞样本
周期:2-3周(视样本数而定)
提交结果:实验数据报告(吸光度值及计算结果)
服务报价:酶联免疫(ELISA)试剂盒价格(组织/细胞样本还须加收匀浆费用以及总蛋白定量检测费用)
一、计算原则:
酶联免疫(ELISA)试剂盒分为96T与48T两种规格
96T规格可做到85个样本, 48T规格可做到37个样本,留11孔用作标准曲线
特别提醒:如客户自行提供酶联免疫ELISA试剂盒,则手工费按元/盒收取(视实验难易程度)。
二、样本提供:
人或动物等的血清、尿液、细胞培养液所需样本量不少于100ul;
人或动植物等组织样本量不少于50mg;
细胞样本量不少于106以上。
三、注意事项:
酶联免疫指标要分清种属、规格,指标的中文名称与英文简称
血清、尿液、细胞培养液或上清液样本直接计算检测价格
组织样本或测定细胞内容物的样本,除测定指标外,还必须加匀浆费用以及总蛋白定量检测。

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