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技术团队为您解答标准曲线问题？
2015-12-3 阅读(1449)
zui近，站上关于ELISA试剂盒的讨论帖子非常多，今天也发表一下自己的一些看法，对ELISA的见解有不对的地方，希望指正或者直接拍砖。
首先，谈一下市场。首先RnD和Bender等一些的ELISA试剂盒还是很值得信赖的，也得到了市场的认可，特别是RnD的盒子，我们卖的很好，就是价格好贵，经费不是很充裕的实验室难消费的起。国内的厂家，质量在灵敏度上和RnD的盒子还是有很大差距，但是有一点是可以肯定的，盒子反映的结果是公正客观的。还有一个缺点就是厂家可供选择的盒子种类比较少，主要集中在标准曲线问题上。许多试剂检测都涉及到标准曲线的问题，标准曲线做的好与坏会直接影响到实验的结果，甚至是关系到实验的成败，那么究竟如何绘制或制作标准曲线呢？
一、做标准曲线样品检测时有几个问题需要注意
1、样品的浓度等指标是根据标准曲线计算出来的，所以首先要把做标准曲线看作是比做正式实验还要重要的一件事，否则后面的实验结果无从谈起。
2、设置标准曲线样品的标准浓度范围要有一个比较大的跨度，并且要能涵盖你所要检测实验样品的浓度，即样品的浓度要在标准曲线浓度范围之内，包括上限和下限。而对于呈S型的标准曲线，尽量要使实验样品的浓度在中间坡度zui陡段，即曲线几乎成直线的范围内。
3、采用倍比稀释法配制标准曲线中的标准样品浓度，这样就能够保证标准样品的浓度不会出现较大的偏离。
4、检测标准样品时，应按浓度递增顺序进行，以减少高浓度对低浓度的影响，提高准确性。
5、标准曲线的样品数一般为7个点，但至少要保证有5个点。
6、做出的标准曲线相关系数因实验要求不同而有所变动，但一般来说，相关系数R至少要大于0.98，对于有些实验，至少要0.99甚至是0.999.
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