中草药DNAout

中草药DNAout
产品及特点 基于PCR的中药分子鉴定方法是辨别中药真伪，保证药材质量，促进中药产业现代化的十分重要的手段。但由于日晒，高温烘烤等处理极大地破坏了中药材DNA的完整性；处理过程中多酚多糖及其氧化物也会与DNA发生复杂的化学反应，所以从中药材中提取可以用于PCR的DNA比从新鲜植物中提取要困难很多。为解决这一问题，天泽基因在植物DNAOUT产品基础上开发了本产品。其特点如下：
1. 适合于大多数药材。
2. 得到的DNA纯净，OD260/280一般都在1.6以上，原液或100倍之内的稀释液一般都能直接作为PCR模板。
3. 操作简单，整个过程只需要三十分钟左右。
4. 试剂无毒无害，环保卫生。
规格及成分 成 份 20 次包装 100 次包装
溶液A 15 mL 75 mL
溶液B 15 mL 75 mL
使用手册 1份 1份

运输及保存 常温运输及保存，有效期一年。
自备试剂 氯仿、异丙醇、75%乙醇
使用方法 1. 65℃预热溶液A，待其沉淀溶化后，充分混匀，取0.75 mL加入到10-15mL的塑料离心管中并放置于65℃待用。
2. 称取20 mg左右的中草药，先剪成或研磨成微小的碎片，然后转移到预热的溶液A中匀浆，匀浆过程中将产生大量泡沫，属于正常现象。也可以液氮研磨后将中草药粉末加入到预热的溶液A中（建议不要在陶器或玻璃研钵中研磨，因为其主要成分二氧化硅会非特异地吸附DNA，降低DNA回收量。但可以在塑料研钵中研磨）。
3. 将匀浆液置于65℃水浴保温5分钟，然后全部转移到新的1.5mL塑料离心管中（此时匀浆液较为粘稠，可将枪头剪去一截后转移上清，植物碎片可倒入）。
4. 12000-15000 g室温离心3分钟，将上清转移到新的1.5mL塑料离心管中（上清液的体积一般为200-700 µL，如果体积超过700 µL，多余部分可以不要）。有的上清液中会有少量细小块状物，但对后续操作没有影响，不必进行特殊处理。
5. 在上清液中加入等体积的溶液B，上下颠倒30秒充分混匀（溶液将呈白色混浊状），然后置冰浴中5分钟。
6. 12000-15000 g室温离心3分钟，转移上清到新离心管中。
7. 加入0.2 mL的氯仿（自备），震荡器上充分振荡30秒混匀。
8. 12000-15000 g室温离心3分钟，两相交界面将有白色膜状物。小心转移上清到新离心管中。
9. 重复氯仿抽提步骤一次，此步可以有效去除含色素物质。
10. 加入0.6-1倍体积的异丙醇（自备），上下颠倒30秒混匀。
11. 12000-15000 g离心5分钟，弃上清，管底将有微小DNA沉淀。
12. 沉淀用75%乙醇清洗2次后，室温晾干。
13. 加入50-100 µL自备缓冲液（如TE）溶解沉淀。DNA即可用于电泳，酶切和PCR等反应。如果需要测OD，则必须乙醇沉淀去除降解的RNA。注意:用本产品提供的RNase处理DNA样品时,做好按《分子克隆手册》等参考书上的方法*去除其中的DNase。