图像流式细胞仪——流式细胞术的突破

图像流式细胞仪——流式细胞术的突破

 ImageStream是一种台式多谱段成像流式细胞仪（Multispectral Imaging Flow Cytometry），能够同时采集6个检测通道中的细胞图像。它将流式细胞检测与荧光显微成像结合于一身，既能提供细胞群的统计数据，又可以获得单个细胞的图像，从而提供细胞形态学、细胞结构和亚细胞信号分布的信息。
    细胞分析实验中，常用的两种方法为显微成像观测和流式细胞术；但是几乎所有的用户都会为显微成像观测法分析细胞数量太有限、统计学分析非常繁琐以及流式细胞术无法观测细胞形态、结构，无法定位荧光信号到特定部位而烦恼，但是从现在起，您大可不必为此烦恼了，位于美国华盛顿州西雅图的Amnis公司生产的ImageStream 100很好地解决了这一问题，它将流式多色检测技术和荧光显微镜图像显示技术集中在一个平台上，提供了全新的细胞分析方法。
    与传统流式细胞仪很类似，ImageStream也是由液流系统，光学系统和电子系统等三大部分组成。液流系统将样本细胞悬液和系统鞘液注入流动室中，使细胞在鞘液流的约束下聚焦在液流的中心，逐个流过检测窗口。光学系统中光源照射通过检测窗口的细胞，从而产生光信号。光源分为两种，其一是用于产生明场细胞图像的卤灯（Brightfield Illuminator），另一种是用于产生荧光细胞图像的激光器。光源照射细胞产生的光信号被具有很大数值孔径（NA：0.75）的物镜收集，然后通过光路系统传递到由二向色镜构成的滤光片堆栈（Dichroic Filter Stack），光信号在这里被分成不同波段投射到一个六通道冷CCD上，产生一个明场细胞图像，一个暗场细胞图像（Side Scatter，SSC）及四个不同荧光通道的细胞图像。ImageStream的光路系统能够自动调整焦距，并实时测定细胞运动速度，而其冷CCD采用时间延迟积分方式（Time Delay Integration，TDI）进行信号采集，上述这些手段保证了系统采集到的细胞图像的质量。
    ImageStream系统还配有功能强大的数据分析软件IDEAS，可以对每个细胞分析超过500种量化参数。这些参数不仅包括细胞整体的散射光和荧光信号强度，还包括对细胞形态，细胞结构及亚细胞信号分布的分析。通过在细胞群体中对这些参数进行统计，分析软件可以生成细胞群体的散点图和柱状图，而这些统计数据与细胞图像是*整合的，比如点击散点图上的点，就可以直观的看到这个点代表的细胞的图像。另外，使用者还能够根据自身研究的特殊需要，进行自定义参数的设定，进行更深入的分析。
    ImageStream图像流式细胞仪的应用范围十分广泛，除了能够完成传统流式细胞仪能够完成的工作，它还能进行亚细胞定位、细胞周期、高通量FISH分析、分子转运示踪、细胞内吞等诸多传统流式细胞仪不能完成的研究工作。