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某些染料如台盼蓝可使死细胞染上蓝色，而活细胞拒染。肿瘤细胞经不同抗癌药物作用后，用台盼蓝染色，于光学显微镜下计数蓝染细胞，即可求出不同药物的细胞毒作用。
1．材料
(1)待检药物：视情况选择lO种左右。按已知临床药物血浆峰值浓度(PPC)，用生理盐水配成3个稀释度(O．1 PPC、1 PPC、lO PPC)。
(2)细胞：手术切除或*取新鲜肿瘤组织制成单细胞悬液。
(3)试剂：1％台盼蓝染液、RPMI 1640培养液(含15％CS、l％HEPES、*100U／ml和*100μg／ml)、1％*或胶原酶、Hanks液。
(4)器材：24孔培养板、显微镜、载玻片、盖玻片、计数器。
2．方法
(1)取新鲜肿瘤组织，置含双抗的RPMI 1640培养液中送检(4℃，3～4h)。迅速移又含5％CS的Hanks液中洗涤2次，去除其表面的凝血块及坏死组织等。然后移至无菌平皿内，用眼科剪将肿瘤*成肉泥状，加入RPMI 1640*培养液，经200目不锈钢罔叠磨过滤，收集单个细胞悬液(如肿瘤组织较硬，则需用*或胶原酶消化后，再用全培养液制成细胞悬液)。
(2)取少许细胞悬液经台盼蓝染色镜检，证实细胞活性在95％以上，调整细胞浓度为l×lO5／ml备用。于24孔培养板内滴加0．9ml／孔的细胞悬液，再于孔内滴加不同浓度的各种抗癌药物(O．1ml／孔)，每个浓度设3个孔，同时设对照孔(加生理盐水O．1ml／孔)，轻轻摇匀，置37℃、5％CO2孵箱中培养24～zt8h。
(3)每孔加1％台盼蓝2滴，充分吹吸混匀，滴于载玻片上加盖玻片后立即于高倍镜下计数100～200个肿瘤细胞中死亡(即蓝染)的细胞数。按下列公式计算细胞毒。以细胞毒大于或等于70％为敏感，大于或等于50％为有效。
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