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悬浮细胞的分离方法

时间:2016/1/8阅读:340
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    从人或动物体内(或胚胎组织)取出的标本组织是结合紧密的多种细胞,不利于各个细胞在体外培养中生长繁殖;若需获取大量细胞,必须将现有的组织块充分散开,使细胞解离成单个细胞。若血液、羊水、胸腔积液或腹水等标本离心分离方法获取。

(一)材料

1.标本血液、羊水、胸腔积液或腹水等悬液材料。

2.试剂PBS、培养液。

3.器具吸管、离心管、培养瓶。

(二)实验方法

1.标本材料若是来自血液、羊水、胸腔积液或腹水的悬液材料,zui简单的方法是采用1000r/min低速离心10min。值得注意的是离心的速度过大,离心时间过长会挤压细胞造成细胞的损伤甚至死亡。

2·离心的沉淀先用无钙、镁PBS洗两次,再用培养液洗一次后,调整适当细胞浓度后分瓶培养。

3.若选用悬液中某些细胞,经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层.这样可根据需要收获目的细胞

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