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二苯胺法测定DNA实验方法

时间:2017/5/16阅读:1578
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大鼠elisa检测试剂盒在浓氯化钠(1―2mol/L)溶液中,脱氧核糖核蛋白的溶解度很大,核糖核蛋白的溶解度很小,在稀氯化钠(0.14 mol/L)溶液中,脱氧核糖核蛋白的溶解度很小,核糖核蛋白的溶解度很大。因此,可利用不同浓度的氯化钠溶液,将脱氧核糖核蛋白和核糖核蛋白从样品中分别抽提出来。
将抽提得的核蛋白用SDS(十二烷基硫酸钠)处理,DNA或(RNA)即与蛋白质分开,可用―异戊醇将蛋白质沉淀除去,而DNA则溶解于溶液中。向溶液中加入适量乙醇,DNA即析出。为了防止DNA或(RNA)酶解,提取时加入EDTA(乙二胺四乙酸)
大鼠elisa检测试剂盒实验材料与仪器 :
1、小白鼠肝脏 
2、匀浆器  
3、离心机5000r/min   
4、量筒50ml(×1),25 ml(×1),10 ml(×1)  
5、 吸管5 ml(×2)
6、水浴锅 
7、真空干燥器
实验试剂 :
1.5 mol/L NaCl 溶液:将292.3g NaCl 溶于水,稀释至1000ml。
2.0.14mol/L NaCl―0.15mol/L EDTA―Na 溶液: 溶8.18g NaCL 及37.2g EDTA―Na 于蒸馏水,稀释至1000ml。
3.25% SDS 溶液: 溶25g 十二烷基硫酸钠于100ml 45% 乙醇
4.0.015 mol/L  NaCL―0.0015 mol/L 柠檬酸三钠溶: 氯化钠 0.828 g及柠檬酸三钠0.341g 溶于蒸馏水,稀释至1000ml。
5.1.5 mol/L NaCL―0.15 mol/L柠檬酸三钠溶:氯化钠 82.8 g 及柠檬酸三钠34.1 g溶于蒸馏水,稀释至1000ml。
6.3 mol/L乙醇钠―0.001 mol/L EDTA―Na溶液: 称取乙酸钠 408 g,EDTA―Na 0.372g 溶于蒸馏水,稀释至1000ml。
7.70%乙醇,80%乙醇,95%乙醇,无水乙醇。
8.二苯胺试剂
9.1 mol/L过氯酸溶液:大鼠elisa检测试剂盒将10ml过氯酸(70%)用蒸馏水稀释至110ml。

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