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接种、分离、培养是微生物检验工作中应用zui多的基本操作技术。
1、接种技术
接种方法有多种,根据接种的菌株不同所使用的培养基也不同,接种时经常使用接种环、接种针、无菌吸管或*等。
⑴接种方法
斜面培养基接种法
适用于纯培养、扩大培养及短时间保存菌种。
2、分离技术使用平板培养基进行分离达到分离出单个菌落的目的,以供微生物的鉴别、纯菌的保留,分离的方法有多种,常用的方法如下:
⑴划线分离法
⑵倾注分离法
⑶涂布分离法
3、培养方法细菌培养,要掌握温度、湿度、时间、环境等因素,《中国药典2010版》规定微生物限度检验细菌培养温度为30~35℃,此温度适于中温菌生长,某些高温菌在该温度下也可以生长。药品污染的控制菌多是中温菌。根据不同菌株及检验目的选择不同的培养时间。根据细菌对环境要求不同常用培养方法如下:
需氧培养法
此为zui常用的培养方法,适于需氧菌和兼性厌氧菌的培养。
厌氧培养法
厌氧菌的培养,必须在无氧的环境中进。
厌氧培养箱法、抽气换气法、厌氧缸法、厌氧培养罐、厌氧袋 。
微需氧培养法
有些细菌为微需氧菌在微需氧环境(5%02、10%CO2、85%N2)生长良好,微需氧培养法常用的有以下几种:
混合气体法、气袋法、双平板法、烛缸法
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