人羊膜细胞WISH细胞
形态特性: 上皮细胞样
生长特性: 贴壁生长
特征特性: zui初以为这株细胞的起源是正常羊膜,但随后通过同工酶分析、HeLa标记染色体和DNA指纹法分析,证实该细胞是HeLa细胞污染的;角蛋白阳性。
培养条件: DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
人羊膜细胞WISH细胞传代方法: 1:2~1:10传代;每周换液2次。
传代情况: P180
冻存条件: 基础培养基+8%DMSO+20%FBS
支原体检测 : 培养法(-)
STR Amelogenin:X;CSF1PO:9,10;D13S317:13.3;D16S539:9,10;D18S51:16;D19S433:13,14;D21S11:27,28;D2S1338:17;D3S1358:15,18;D5S818:11,12;D7S820:8,12;D8S1179:12,13;FGA:21;TH01:7;TPOX:8,12;vWA:16,18;
染色体 : 70~75,有若干变异染色体
使用权限 : A类
人羊膜细胞WISH细胞预防细胞污染的注意事项
1)实验进行前,超净台用紫外灯照射30~60min,然后用75%酒精擦拭超净台台面,并开启超净台风机运转20min左右再开始实验操作。
2)实验用品用75%酒精擦拭后才能放入超净台内;实验用品用完应移出超净台,以利于气流的流通。实验完成后用75%酒精擦拭超净台台面。
3)每次操作只处理一种细胞;即使不同细胞使用相同的培养基也不要共享同一瓶培养基,避免细胞间的交叉污染。
4)操作时小心取用无菌的物品,避免污染。勿碰触吸管尖头,不小心碰触后应立即更换;不要在打开的容器瓶口正上方操作,容器打开后,倾斜45°操作,操作完成后及时盖上瓶盖。
5)CO2培养箱的清洁是较易被忽视的地方,应1~2个月对培养箱定期进行清洁消毒。先用75%酒精擦拭培养箱内壁、隔板、水盘2~3次,用双蒸水清洗,再用酒精棉球擦拭一遍,zui后紫外灯照射4h以上。水盘内加入无菌水(应每周更换),待培养箱内温度、湿度、CO2浓度稳定后再放入细胞。
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