人丙二醛ELISA检测试剂盒实验开始前，请提前配置好所有试剂，试剂或样品稀释时，均需混匀，混匀时尽量避免起泡。
人甘油三酯ELISA检测试剂盒实验测定具体步骤：
1．确定本次检测所需的已包被抗体的酶标板孔数目，并增加 1 孔作为 TMB 空白显色孔。 总数=样品数+9；做双份检测时×2。其余重包装好放如冰箱中。
2．将标准品各 0.1ml 依次加入一排 7 孔中，1 孔只加样品稀释液的作为零孔。对于血清、体液、 组织匀浆或细胞培养上清，直接加已用样品稀释液稀释的样品 100μ ι 。
3．酶标板加上盖，37℃反应 90 分钟。
4．反应后用自动洗板机吸去酶标板内的液体；或甩去酶标板内液体，再对着吸水纸拍几下。 不洗。
5．将准备好的生物素抗体工作液按每孔 0.1ml 依次加入。（TMB 空白显色孔除 外）。37℃反应 60 分钟。
6． 0.01M TBS 或 0.01M PBS 洗涤 3 次，每次浸泡 1 分钟左右。
7．将准备好的 ABC 工作液按每孔 0.1ml 依次加入（TMB 空白显色孔除外）。37℃反应 30 分钟。
8． 0.01M TBS 或 0.01M PBS 洗涤 5 次，每次浸泡 1-2 分钟左右。
9．按每孔 90μ ι 依次加入已在 37℃平衡 30 分钟的 TMB 显色液，37℃避光反应 20-25 分钟 （注意：显色时间供参考，因用户实验室条件差异，显色时间会有所不同。此时肉眼可 见标准品的前 3-4 孔有明显的梯度蓝色，后 3-4 孔差别不明显）。
10．按每孔 0.1ml 依次加入 TMB 终止液，此时蓝色立转黄色。
11．用酶标仪在 450nm 测定 O.D.值。
人甘油三酯ELISA检测试剂盒实验所涉及到的仪器如下：
1、酶 标 仪
酶标比色仪介绍：
酶标比色仪简称酶标仪，通常指于测读ELISA结果吸光度的光度计。针对固相载体形式的不同，各有特制的适用于板、珠和小试管的设计。许多试剂公司配套供应酶标仪。酶标仪的主要性能指标有：测读速度、读数的准确性、重复性、精确度和可测范围、线性等等。优良的酶标仪的读数一般可精确到0.001，准确性为lusm1%，重复性达0.5%。举例说，若某孔测得的A值为1.083，则该孔相对于空气的真实A值应为1.083lusm0.01(1.073~1.093)，复测定数次，其A值均应1.083lusm0.05(1.078~1.088)在之间。酶标仪的可测范围视各酶标仪的性能而不同。普通的酶标仪在0.000~2.000，新型号的酶标仪上限拓宽达2.900，甚至更高。超出可测上限的A值常以"*"或"over"或其它符号表示。应注意可测范围与线性范围的不同，线性范围常小于可测范围，比如某一酶标仪的可测范围为0.000~2.900，而其线性范围仅0.000~2.000，这在定量ELISA中制作标准曲线时应予注意。
酶标仪不应安置在阳光或强光照射下，操作时室温宜在15~30℃，使用前先预热仪器15-30分钟，测读结果更稳定。
测读A值时，要选用产物的敏感吸收峰，如OPD用492nm波长。有的酶标仪可用双波长式测读，即每孔先后测读两次，*次在zui适波长(W1)，第二次在不敏感波长(W2)，两次测定间不移动ELISA板的位置。例如OPD用492nm为W1，630nm为W2，zui终测得的A值为两者之差(W1-W2)。双波长式测读可减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。各种酶标仪性能有所不同，使用中应参考对应仪器说明书。
2、洗 板 机
3、离 心 机
4、培 养 箱
关键词：人甘油三酯ELISA检测试剂盒
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