单酶反应检测

利用单酶与底物反应，然后用各种方法检测出反应前后物质的变化情况，从而确定底物的量。这是zui简单的酶法检测技术。以*脱羧酶为例，L-*脱羧酶专一地催化L-*脱羧生成γ-氨基丁酸和二氧化碳，生成的二氧化碳可以用气体检测法测定。该酶已广泛地用于L-*的定量分析，可使用游离酶、固定化酶或酶电极。检测二氧化碳可以用二氧化碳电极等。利用脲酶专一地催化尿素水解生成氨和二氧化碳的特性，通过气体检测或者使用氨电极、二氧化碳电极等，测出氨或二氧化碳的量，就可确定尿素的量。此外，可用于单酶反应检测的还有葡萄糖氧化酶、*氧化酶、荧光素酶等。通过单酶催化反应进行物质检测，具有简便、快捷、灵敏、准确的特点，是酶法检测中zui常用的技术，具有广泛的应用前景。

多酶偶联反应检测

多酶偶联反应检测是利用两种或两种以上的酶的联合作用，使底物通过两步或多步反应，转化为易于检测的产物，从而测定被测物质的量。多酶偶联反应检测已有不少成功应用的例子。例如，通过葡萄糖氧化酶与过氧化物酶偶联可以检测葡萄糖的含量，使用时先将葡萄糖氧化酶、过氧化物酶与还原型邻联甲苯胺一起用明胶固定在滤纸条上制成酶试纸。测试时将酶试纸与样品溶液接触，在一定的时间內试纸即显色，从颜色的深浅判定样品液中葡萄糖的含量。还可利用β-半乳糖苷酶与葡萄糖氧化酶偶联反应检测乳糖的含量，已糖激酶与葡萄糖氧化酶偶联反应可以用于测定ATP的含量。