常用抗体标记荧光染料的特性及其应用
1、FITC:激发波长488nm,zui大发射波长525nm。
1)其标记的抗体适用于所有配备488nm氩离子激光器的流式细胞仪;
2)在流式细胞仪的FL1通道检测;
3)可用于荧光显微镜技术
4)荧光强度易受PH值影响,PH值降低时其荧光强度减弱。
2、Alexa Fluor 488:激发波长488nm,zui大发射波长519nm。
1)其标记的抗体适用于所有配备488nm氩离子激光器的流式细胞仪;
2)在流式细胞仪的FL1通道检测;
3)具有超乎寻常的光稳定性,非常适用于荧光显微镜技术;
4)在较宽的PH值范围内保持稳定(PH4~10)。
3、Cy3:激发波长488nm,zui大发射波长570nm。
1)其标记的抗体适用于所有配备488nm氩离子激光器的流式细胞仪;
2)在流式细胞仪的FL2通道检测;
3)适用于荧光显微镜技术;
4)为小分子染料,非常适合需小分子染料的流式细胞术,荧光强度低于PE。
4、Cy5:激发波长633/635nm,zui大发射波长670nm。
1)其标记的抗体适用于所有配备633nm氩离子激光器的流式细胞仪;
2)在流式细胞仪的FL4通道检测;
3)适用于荧光显微镜技术;
4)同样为小分子染料,非常适合需小分子染料的流式细胞术,荧光强度低于APC。
5)与单核和粒细胞非特异性结合多,易出现假阳性结果。
5、PE:激发波长488nm,zui大发射波长575nm。
1)其标记的抗体适用于所有配备488nm氩离子激光器的流式细胞仪;
2)在流式细胞仪的FL2通道检测;
3)其荧光泯灭性强,不适用于传统的荧光显微镜技术,但适用于激光共聚焦显微镜技术。
6、PE-TR:激发波长488nm,zui大发射波长615nm。
1)在Beckman Coulter流式细胞仪的FL3通道检测;
2)可适用于小功率激光器的流式细胞仪,也可使用于大功率激光器的大流式细胞仪。
7、PE-Alexa Fluor 610:激发波长488nm,zui大发射波长628nm。
1)在Beckman Coulter流式细胞仪的FL3通道检测;
2)荧光强度高;
3)可适用于小功率激光器的流式细胞仪,也可使用于大功率激光器的大流式细胞仪。
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