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江苏科研试剂园区E栋1109室
编:
224100
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https://www.hbzhan.com/st557658/
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鸡血清的制备与解冻方式

2019-9-20  阅读(7325)

  鸡血清作为辅料加入制备副鸡嗜血杆菌或禽多杀巴氏杆菌等细菌的培养基之一, 主要应用于细菌培养,现市场购买鸡血清,价格高,质量参差不齐,往往影响生产的稳定性和半成品的含菌量。
 
  鸡血清的制备大致可分为以下几个步骤:
 
  (1)鸡血用离心机离心,收集滤过液,冻存;
 
  (2)7-10天后取出化冻,用离心机离心后取上清液,冷冻保存;
 
  (3)冻存3— 5天后,取出放在温室中将血清化开,进行两次粗滤澄清;
 
  (4)过滤除菌;
 
  (5)室温放置,然后置于37°C环境培养M小时,即得。
 
  鸡血清解冻:将血清从冰冻区中取出后(切勿直接将血清从-20℃进入37℃解冻,这样因温度改变太大,容易造成蛋白质凝集而出现沉淀),先置于2~8℃区域中使之融化,然后在室温下使之全融。
 
  使用前再预温到将使用的温度(如37℃),但必须注意的是,解冻过程中应轻轻地摇晃均匀。血清在解冻过程中可能会出现少量絮状或片状析出物,主要是血清中脂蛋白的变性或是纤维蛋白(形成凝血的蛋白之一)析出,但这些析出物,并不影响血清本身的质量。
 
  若一次无法用完一瓶,建议无菌分装血清至恰当的灭菌容器内,再放回冷冻。
 
  鸡血清保存方法:
 
  血液凝固析出的淡黄色透明液体。如将血液自血管内抽出,放入试管中,不加抗凝剂,则凝血反应被激活,血液迅速凝固,形成胶冻。凝血收缩,其周围所析出之淡黄色透明液体即为血清,也可于凝血后经离心取得。在凝血过程中,纤维蛋白原转变成纤维蛋白块,所以血清中无纤维蛋白原,这一点是与血浆zui大的区别。而在凝血反应中,血小板释放出许多物质,各凝血因子也都发生了变化。这些成分都留在血清中并继续发生变化,如凝血酶原变成凝血酶,并随血清存放时间逐渐减少以至消失。这些也都是与血浆区别之处。但大量未参加凝血反应的物质则与血浆基本相同。为避免抗凝剂的干扰,血液中许多化学成分的分析,都以血清为样品。


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